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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專用試劑>生物試劑>50T 芥末源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

50T 芥末源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海莼試生物技術(shù)有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號 50T
  • 產(chǎn)地 進(jìn)口,、國產(chǎn)
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間 2020/7/29 20:52:28
  • 訪問次數(shù) 1702

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上海莼試生物技術(shù)有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology  Co. Ltd.  專業(yè)服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,擁有分子生物學(xué),、醫(yī)學(xué),、藥學(xué)、化學(xué)等方面的科研技術(shù)團(tuán)隊(duì),,經(jīng)營科研生化試劑,、分析試劑、實(shí)驗(yàn)耗材,,推出技術(shù)先進(jìn),、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國乃至于世界各地科研機(jī)構(gòu),、工業(yè),、電子、醫(yī)療,、科技等領(lǐng)域的客戶,,提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。推出十幾個種類產(chǎn)品線,,部分產(chǎn)品接受定制服務(wù),!



      公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈,!

 

 

 

PCR檢測試劑盒,、PCR試劑盒, 核酸檢測試劑盒,,熒光定量檢測試劑盒,,生化試劑盒 ,比色法試劑盒,,酶活性檢測試劑盒,,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫檢測試劑盒,,試劑盒,,ELISA試劑盒,抗體,,重組蛋白,,分光光度法檢測試劑盒,細(xì)胞株,,原代細(xì)胞,,細(xì)胞培養(yǎng)基,,標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑,、abcam抗體,、R&D抗體、CST抗體,、ATCC細(xì)胞,、BD公司、GE公司公司產(chǎn)品,。

CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 CP934926 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品名稱

芥末源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

英文名稱

詳見說明書

貨號

CP934926

儲存條件:

14℃或-20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,收集血液后,,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法:

芥末源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān),。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,,而淬滅劑則在3’ 末端,。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅,。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離,。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系,。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性,。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素,。如果不能很好純化樣品DNA,,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二,、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,,只提供沒有傳染性的,、可以直接使用的DN段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管,,分別為6,,5,4,,3,,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,,下同),。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,,梯度稀釋至10E7拷貝/μL),。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得10E6拷貝/μL的陽性對照,。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照,。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),,每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,,并以之為縱軸,,以濃度的對數(shù)值為橫軸,,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

應(yīng)用案例:
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容,。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout,。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分),。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DN段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2,。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
6.換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
7.換槍頭,,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分。
以下是公司正在銷售的產(chǎn)品:

LYK5  蛋白激酶LYK5抗體竹節(jié)參皂苷IVa

LY-96/MD-2  MD-2蛋白抗體標(biāo)準(zhǔn)品

LY-86/MD-1  MD-1蛋白抗體酯蟾配基

Ly-6G/Gr-1  淋巴細(xì)胞抗原6G抗體紫檀芪

LXR alpha  肝臟X受體抗體正胺

Lxn/Latexin  羧肽酶抑制抗體澤瀉醇 A

Lumican  基膜聚糖蛋白抗體澤瀉醇 B

Luciferase  熒光素酶抗體左旋肉

Lubricin/SZP  淺表層粘膜蛋白多糖抗體紫莖女貞苷A

LTBP4  轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體紫莖女貞苷B

LTB4-R2  白三烯B4受體2抗體紫莖女貞苷C

LTB4-R1/BLTR  白三烯B4受體1抗體標(biāo)準(zhǔn)品

LTA4H  白三烯A4水解酶抗體紫莖女貞苷D

LST1  淋巴細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體cis-紫莖女貞苷B

LSP1  白細(xì)胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體藏紅花酸羊口蹄疫抗體ELISA檢測試盒黃芩苷

牛結(jié)核病抗體檢測試紙條黃芩素

??谔阋?ABC病抗體ELISA檢測試盒

布魯桿菌抗體檢測試紙條黃楊

小反芻獸疫病抗體檢測試紙條黃楊酮

芥末源性成分探針法熒光定量PCR檢測試劑盒小反芻獸疫抗體ELISA檢測試盒灰氈毛忍冬皂苷

??谔阋呖贵wELISA檢測試盒灰氈毛忍冬皂苷

牛羊布病抗體ELISA檢測試盒茴芹內(nèi)酯

牛、羊口蹄疫病抗體ELISA檢測試盒茴香腦

豬用旋毛蟲抗體ELISA檢測試盒肌氨酸

定量PCR檢測試劑盒供應(yīng)



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