堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
參考價(jià) | ¥ 60 |
訂貨量 | ≥1 件 |
- 公司名稱 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/1/14 12:56:59
- 訪問次數(shù) 1565
聯(lián)系方式:楊小姐13585717991 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!
公司主營: 各種實(shí)驗(yàn)代做:WB代做,,免疫組化,,PCR代做,細(xì)胞檢測(cè),,食品安全檢測(cè)試劑,獸藥殘留檢測(cè)試劑,,動(dòng)物疫病類檢測(cè),,銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,,ELISA試劑盒,,細(xì)胞,血清,,等等
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
---|
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:
堿性磷酸酶(AKP) 的顯示方法zui早由Gomeri (1939) 提出,,現(xiàn)在這種方法稱為Gomeri法。堿性磷酸酶是指磷酸單酯酶I,它能在pH8. 6~10.0的zui適條件下分解磷酸單酯,,對(duì)于與磷酸相接的醇基沒有特異性,,Gomeri法是讓該酶在堿性條件下,分解甘油磷酸鈉,,產(chǎn)生磷酸根,。
堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理:
在一定條件下,,使細(xì)胞中的酶作用于酶的底物,使其產(chǎn)物在原地進(jìn)行捕捉,、沉淀轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,。細(xì)胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0- 9.6)環(huán)境下使作用液中的底物(a- 磷酸萘酚鈉)水解,產(chǎn)生出a蔡酚,,然后再與偶氮鹽偶聯(lián),,生成不溶性的耐曬染料(zui終產(chǎn)物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同)。
實(shí)驗(yàn)操作流程:
1,、取材,、固定,、包埋,、切片;
2.取已粘好烘干的切片兩塊,,放入二甲苯(一)→二甲苯(二) (各3-4分鐘) 的染缸中進(jìn)行脫蠟,,再經(jīng)100%乙醇(一)- +100%乙醇(二) - -95%乙醇- -90%乙醇- -70%乙醇- -30%乙醇- +z水,。 每級(jí)各一分鐘,,在移切片時(shí),,用鑷子夾住切片震蕩并提起,,放下反復(fù)幾次,,在移入下-染缸邊緣前稍停留,。讓溶液滴凈后,再入下一染缸,以免把上一染缸溶液過多帶入下-染缸,,而影響切片質(zhì)量;
3.將其中一塊切片以蠟筆作-標(biāo)記(用作對(duì)照組切片),,放入沸水中煮沸5分鐘;
4.將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,作用液要事先預(yù)熱到37"C,水浴中進(jìn)行:
5,、取出切片在蒸餾水中洗滌;
6,、放入硝酸鈷溶液2-3分鐘;
7.蒸餾水沖洗干凈,否則切片易被污染,,影響定位;
8,、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;
9.蒸餾水沖洗干凈;
10.經(jīng)各級(jí)酒精脫水。即30%乙醇- -70%乙醇- -90%乙醇- -950%乙醇- -100%乙醇 (二)- -100%乙醇 (一),,各級(jí)一分鐘在顯微鏡下觀察,,細(xì)胞中有黑色沉淀存在的地方,就表明有酶的存在,。煮沸的對(duì)照切片無黑色沉淀,。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):
| |||
| |||
| |||
| |||