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核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù),、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù),、免疫沉淀技術(shù)服務(wù),、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、PCR實(shí)驗(yàn)服務(wù),,并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的化學(xué)試劑,、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測(cè),,ELISA試劑盒,、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品,、對(duì)照品,、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測(cè)試劑,、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品,、獸藥殘留檢測(cè)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域,、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域,、環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,,客戶廣泛分布于食品、制藥,、第三方檢測(cè),、環(huán)境測(cè)試機(jī)構(gòu)、化工,、科研院校,、生物工程等行業(yè)。

主營:

1生化試劑,、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、

2.ELISA試劑盒,、分離液,、分離液試劑盒

3.細(xì)胞:*細(xì)胞、國產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國產(chǎn)正常細(xì)胞,、腫瘤耐藥細(xì)胞

4.食品安全檢測(cè)試劑,、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑

5.耗材:常用實(shí)驗(yàn)耗材,、移液器


公司主營: 各種實(shí)驗(yàn)代做:WB代做,,免疫組化,PCR代做,,細(xì)胞檢測(cè),,食品安全檢測(cè)試劑,獸藥殘留檢測(cè)試劑,,動(dòng)物疫病類檢測(cè),,銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,,ELISA試劑盒,,細(xì)胞,血清,,等等

應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

核仁組區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

.核仁組成區(qū)嗜銀(AGNOR)染色簡(jiǎn)介

核仁組成區(qū)(NORs)是染色體上的一個(gè)編碼核糖體RNA(rRNA)的片段,,存在于DNA特異性環(huán)上,凸向核仁,。在電鏡下,,核仁組成區(qū)為在電子致密區(qū)中的境界不清的淺染區(qū)域。在石蠟切片上,在核仁中見到的每一個(gè)點(diǎn)狀反應(yīng)顆粒有可能代表多 個(gè)AgNOR位點(diǎn),。核仁組成區(qū)嗜銀蛋白染色主要特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,、批量染色的較為經(jīng)濟(jì), AgNOR位點(diǎn)的數(shù)量增加與細(xì)胞增殖性增加有關(guān),對(duì)于良惡性腫瘤的鑒別具有一定的意義,。

二,、試劑配制

1. AgNOR染色液

甲液:明膠2 g溶于雙蒸水至99 ml,在60°C使之*溶解,再加入純甲酸1 ml搖勻待用,。

乙液: AgNO350 g溶解于雙蒸水中至100 ml, 4°C冰箱保存,。

2. AgNOR工作液

取甲液10 ml,乙液20 ml臨用前混合。

三,、染色步驟

1.切片脫蠟至水

2.雙蒸水洗2次

3.AgNOR工作液中(25°C) 浸染30分鐘(暗處進(jìn)行) (鏡下觀察)

4.脫水,,透明,封固

5結(jié)果:油鏡觀察,,細(xì)胞核及胞質(zhì)背暴為淡黃色,,AgNOR呈棕黑色顆粒狀。

四,、樣本說明

1,、 石蠟切片

取材: 1.組織離體后需及時(shí)固定; 2.組織標(biāo)本不宜過大,、過厚。

固定: 1.固定液: 10%福爾馬林(4%Paraformaldehyde) 或10%中性甲醛: 2.用量: -般固定液的量與組織體積比為

10:1~20:1; 3. 固定:適宜的固定時(shí)間,,主要根據(jù)材料的大小松密程度及固定液的穿透速度而定,。

保存:切片經(jīng)60°C烤片3-5小時(shí)后,,可于常溫或4°C干燥保存,。

2.冰凍切片

取材:取材后需立即置于超低溫冰箱或液氮中保存。

固定:樣本冰凍切片后,,應(yīng)立即放入甲醇,、acetone. 95%酒精、 4%Paraformaldehyde等固定液中固定,。

保存:固定好的切片自然風(fēng)干,,密封后置于-80°C. -20°C保存, 盡快用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

3.細(xì)胞塊石蠟切片

細(xì)胞量較多的樣品,,可離心分離所需細(xì)胞,用中性甲醛固定后制作成瓊脂細(xì)胞塊,,然后按照制作石蠟切片的操作流程進(jìn)行切

片,。

4、細(xì)胞爬片

在孔板里做的細(xì)胞爬片,,爬片取出后,,用PBS洗滌2次(根據(jù)研究目的,PBS洗滌可選擇不做),。用4%Paraformaldehyde49C固定15分鐘,,將表面液體吹干,置于-20°C保存,。若在短時(shí)間內(nèi)即開展實(shí)驗(yàn),可在加固定液后,,于4°C冰箱中放置一段時(shí)間。

5.細(xì)胞涂片細(xì)胞涂片常用的固定液有95%酒精(為常用),、酒精 Glacial acetic acid solution. Ethyl ether-酒精液和

Carney's液等,。

、注意事項(xiàng)

1.常用的固定液為中性甲醛和4%Paraformaldehyde, 能使大多數(shù)抗原保存良好,,適用于免疫組織化學(xué),。

2.病理實(shí)驗(yàn)切片好是防脫片,以免實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)掉片,。若客戶提供切片,,應(yīng)告知切片有無防脫處理。

3.骨組織,、皮膚組織或脂肪含量較高的樣本,實(shí)驗(yàn)過程中有較高的掉片幾率,。

4.客戶可提供組織塊(以10%福爾馬林,、4%Paraformaldehyde或10%中性甲醛固定, 如組織塊極小請(qǐng)事先說明) . 蠟塊

或切片(使用免疫組化切片,,以避免實(shí)驗(yàn)過程中掉片)

5.待檢測(cè)蛋白的種屬,、實(shí)驗(yàn)分組情況及實(shí)驗(yàn)背景資料、其他具體要求等需事先說明,。

6.若客戶提供骨組織或鈣化程度較高的組織進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,需進(jìn)行脫鈣處理。

7.浸泡在固定液中的組織樣本,,在運(yùn)輸中容器需密封,,防止破碎、滲漏,。

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

 

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

細(xì)胞增殖

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

Taqman探針

ATP/ADP檢測(cè)

 

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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