一,、服務介紹

     掃描電鏡是1965年發(fā)明的較現(xiàn)代的細胞生物學研究工具,，它具有制樣簡單、放大倍數(shù)可調范圍寬,、圖像的分辨率高,、景深大等特點。近年來,，掃描電鏡已廣泛地應用在生物學,、醫(yī)學、等學科的領域中,。

二,、實驗原理

     主要是通過發(fā)射電子聚焦光束來掃描樣品的表面形態(tài).電子束與樣品表面的樣子發(fā)生作用,產(chǎn)生多種能夠被檢測的信號,這些信號就包含了樣品的表面形態(tài)和組成.染色。

三,、實驗流程

1. 樣品的初步處理

a.取材樣品面積可達8mm×8mm,，厚度可達5mm。對于易卷曲的樣品如血管,、胃腸道粘膜等,，可固定在濾紙或卡片紙上，以充分暴露待觀察的組織表面,。

b.樣品的清洗

(1)用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗,；

(2)用5%的蘇打水清洗；

(3)用超聲震蕩或酶消化的方法進行處理,。

c. 固定

固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同,，常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大,，固定時間應適當延長,。也可用快速冷凍固定。

d. 脫水

樣品經(jīng)漂洗后用逐級增高濃度的酒精或丙酮脫水,，然后進入中間液,，一般用醋酸異戊酯作中間液。

2. 樣品的干燥

a.空氣干燥法

空氣干燥法又稱自然干燥法,，就是將經(jīng)過脫水的樣品,，讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥。這種方法的醉大優(yōu)點是簡便易行和節(jié)省時間,；它的主要缺點是在干燥過程中,，組織會由于脫水劑揮發(fā)時表面張力的作用而產(chǎn)生收縮變形。因此,，該方法一般只適用于表面較為堅硬的樣品,。

b. 冷凍干燥法

(1)置于冷凍保護劑中：將樣品置于冷凍保護劑中浸泡數(shù)小時,。常用的冷凍保護劑為10%～20%二甲基亞砜水溶液，或15%～40%甘油水溶液,。

(2)驟冷：將經(jīng)過保護劑處理的樣品迅速投入用液氮預冷至(150℃的氟利昂冷凍劑中,，使樣品中的水分很快凍結。

(3)干燥：將已凍結的樣品移到冷凍干燥器內已預冷的樣品臺上,，抽真空,，經(jīng)幾小時或數(shù)天后，樣品即達到干燥,。本方法不需要脫水,，避免了有機溶劑對樣品成分的抽提作用，不會使樣品收縮,，也是較早使用的方法,。但是，由于花費時間長,，消耗液氮多,，容易產(chǎn)生冰晶損傷，因此未被廣泛應用,。

3. 樣品的導電處理(真空鍍膜法)

    真空鍍膜法是利用真空膜儀進行的,。其原理是在高真空狀態(tài)下把所要噴鍍的金屬加熱，當加熱到熔點以上時,，會蒸發(fā)成極細小的顆粒噴射到樣品上,，在樣品表面形成一層金屬膜，使樣品導電,。噴鍍用的金屬材料應選擇熔點低,、化學性能穩(wěn)定、在高溫下和鎢不起作用以及有高的二次電子產(chǎn)生率,、膜本身沒有結構?，F(xiàn)在一般選用金或金和碳。為了獲得細的顆粒,，有用鉑或用金-鈀,、鉑-鈀合金的。金屬膜的厚度一般為10 nm～20 nm,。真空鍍膜法所形成的膜,，金屬顆粒較粗，膜不夠均勻,，操作較復雜并且費時,，目前已經(jīng)較少使用。4. 拍攝

四、客戶提供

組織,、細胞

五,、提供

基本實驗步驟、藥品,、樣品處理,、圖片及圖片分析

實驗周期：3-4周

所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于食用,，醫(yī)療等其它用途,。