供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
貨號(hào) |
CM7127 |
5637 人膀胱癌細(xì)胞 Cat NO.: CL-0002 |
細(xì)胞名稱 | 5637(人膀胱癌細(xì)胞) |
種屬 | 人 |
年齡(性別) | 男,;68歲 |
組織來源 | 膀胱;癌 |
生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
背景描述 | 5637細(xì)胞能生成SCF,、IL-1,、IL-3、IL-6,、G-CSF,、GM-CSF等。 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640(貨號(hào):PM150110)+10% FBS(貨號(hào):164210-500)+1% P/S(貨號(hào):PB180120) |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,,95%,;CO2,,5% 溫度:37℃ |
雞肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、您收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,,放入37℃,,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代,。
2,、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min,;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,,后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4)待細(xì)胞*貼壁后,,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代,。
3,、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min,;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中,;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,,然后將其移入-80℃過夜,,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。