1078166-57-0 PF-04418948
參考價(jià) | ¥ 1100 |
訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱 上海卡努生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) 1078166-57-0
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2024/11/1 11:19:38
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PF-04418948
CAS:1078166-57-0
純度Purity≥98%
單位:瓶
PF-04418948
5mg 1100元
10mg 2000元
慢病毒感染快速指南
1. 將目的細(xì)胞按 30%匯合度接種到 24 孔板,,約 3-5×104細(xì)胞數(shù)/孔,不同細(xì)胞因?yàn)榧?xì)胞大小不同細(xì)胞數(shù)量會(huì)不同,,快速指南以細(xì)胞數(shù)量為 5×104為例,,加入 500uL wan全培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
2. 接種后 12-20h 感染陰性對(duì)照慢病毒(接種細(xì)胞至病毒感染細(xì)胞時(shí)間不宜太長(zhǎng),,否則細(xì)胞增殖影響細(xì)胞密度不利用后期抗性篩選),。
3.加病毒量計(jì)算方法:(細(xì)胞數(shù)×MOI 值/病毒滴度)×103=病毒量(uL),,加病毒量見(jiàn)下表。同時(shí)加入 Polybrene,,每孔加 0.25uL,,濃度為 10mg/mL Polybrene,細(xì)胞培養(yǎng)液中終濃度為5ug/mL,。
4.感染 16-20h 后更換培養(yǎng)基,,棄去培養(yǎng)基,每孔加入 500uL 新鮮的培養(yǎng)基,。
5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光,。(注:如果 48h-96h 期間細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%,請(qǐng)及時(shí)傳代培養(yǎng)),。
6.建議將 48 孔板細(xì)胞進(jìn)行傳代,,傳代 12 孔板,后繼續(xù)觀察熒光,,根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和熒光細(xì)胞比例綜合判斷細(xì)胞感染最佳 MOI 值,。一般選擇細(xì)胞生長(zhǎng)良好,感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件,。(注:100%熒光感染不一定為細(xì)胞最佳 MOI 值,,因?yàn)榭赡軙?huì)造成細(xì)胞慢病毒感染拷貝數(shù)太高,影響細(xì)胞狀態(tài),。
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