平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后,，其中的微生物充分分散成單個細(xì)胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上,，經(jīng)過培養(yǎng),，由每個單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個單細(xì)胞,。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù),，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。但是,，由于待測樣品往往不易*分散成單個細(xì)胞,，所以，長成的一個單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個細(xì)胞,。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低,。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果，現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(colony-forming units,，cfu)而不以菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量,。
平板菌落計(jì)數(shù)法雖然操作較繁，結(jié)果需要培養(yǎng)一段時(shí)間才能取得,，而且測定結(jié)果易受多種因素的影響,，但是，由于該計(jì)數(shù)方法的優(yōu)點(diǎn)是可以獲得活菌的信息,，所以被廣泛用于生物制品檢驗(yàn)(如活菌制劑),，以及食品,、飲料和水(包括水源水)等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測。


平板菌落計(jì)數(shù)法操作步驟 
1,、編號 
取無菌平皿9套,，分別標(biāo)明為10-4、10-5,、10-6各三套,，另取6支無菌試管分別標(biāo)記為10-1、10-2,、10-3,、10-4、10-5,、10-6,。 
2、稀釋 
用1mL無菌吸管吸取1mL已充分混勻的大腸桿菌菌懸液,，精確地放0.5mL至10-1的試管中,，此即為10倍稀釋，將多余的菌液放回原菌液中,。 
將10-1試管充分振蕩,、混勻。另取一支1ml吸管插入10-1試管中來回吹吸菌液三次,，進(jìn)一步將菌體分散,、混勻。動作不要太猛太快,，吸時(shí)插入,，吹時(shí)提出，再用此吸管吸取10-1菌液1mL,，精確地放0.5mL至10-2試管中,，此即為100倍稀釋，依次類推,， 
3,、取樣 
用三支1ml無菌吸定分別吸取10-4、10-5,、10-6的稀釋菌懸液各1mL,，對號放入編好號的無菌平皿中，每個平皿放0.2mL 
4,、倒平板 
盡快向上述盛有不同稀釋菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45度的LB培養(yǎng)基約15-20ml,，置水平位置迅速旋動平皿，使培養(yǎng)基與菌液混合均勻。 
5,、培養(yǎng) 
倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí),， 
6、計(jì)數(shù) 
算出同一稀釋度三個平板上的菌落平均數(shù),，并按下列公式進(jìn)行計(jì)算,； 每毫升中菌落形成單位（cfu）= 同一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5