1,、原理及適用范圍 

大腸桿菌（Escherichia coli）和大腸菌群（Coliform）都是存在于溫血動物腸道和糞便的細(xì)菌,，是條件性致病菌，主要造成水體污染,，也可能引起食物中毒的發(fā)生,。綠洲生化大腸桿菌大腸菌群測試片（FilmplateTM E.coli&coliform count plate BE203）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，可以同時檢測大腸桿菌和大腸菌群,，含有大腸菌選擇性培養(yǎng)基,、冷水可溶性的吸水凝膠和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示劑。大腸桿菌顯藍(lán)色,，其他大腸菌群顯紅色,，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總的大腸菌群數(shù)。 本產(chǎn)品適合于食品及原料中大腸菌群的計(jì)數(shù),，如消毒牛乳,、冷飲和調(diào)味品等樣品的檢測，也可用于表面的衛(wèi)生檢測,。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸桿菌計(jì)數(shù)——PetrifilmTM 測試片法（GB/T 4789.38）,。 

2,、操作方法 

2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),，制成1:10的樣品勻液,，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),，振搖后成為1:100的樣品勻液,，依次往下稀釋。 

2.2,、接種：一般食品選1～2個稀釋度進(jìn)行檢測,，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測。將大腸桿菌大腸菌群測試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺面,，揭開上層膜,，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下,，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,，每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照,。 

2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,，培養(yǎng)15～24h,。 

3、結(jié)果判讀 

培養(yǎng)后大腸桿菌顯藍(lán)色,，其他大腸菌群顯紅色,，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總大腸菌群數(shù)。

4,、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 

4.1,、選擇菌落數(shù)在15～150個之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)。 

4.2,、若兩個稀釋度的菌落數(shù)均在15～150之間,，則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)，即為每毫升（或每克）樣品中的大腸菌群菌落形成單位數(shù),； 

4.3,、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數(shù)都小于15，則計(jì)數(shù)稀釋度zui低的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之,；如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長,，則以小于1乘以zui低稀釋倍數(shù)報(bào)告之,； 

4.4、如果所有稀釋度的菌落數(shù)都大于150,，計(jì)數(shù)稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。計(jì)數(shù)菌落數(shù)大于150的測試片時，也可計(jì)數(shù)一個或兩個具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù),，換算成單個方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20（濾紙區(qū)面積為20cm2）,，即為測試片上估算的菌落數(shù)。報(bào)告單位以CFU/mL（或CFU/g）表示,。 

5,、附加說明 

5.1、樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5～7.5之間,，必要時用1mol/L氫氧化鈉（NaOH）或1mol/L鹽酸（HCl）調(diào)節(jié)pH,。 

5.2、我國的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)大多都以大腸菌群（Coliform）作為檢測指標(biāo),，而歐盟等許多國家則以大腸桿菌（E.coli）作為檢測對象,，因此，本產(chǎn)品對于出口食品和航空配餐等企業(yè)具有更廣泛的應(yīng)用前景,。

6,、綠洲生化大腸桿菌大腸菌群測試片保存條件

本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年,，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完,。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,，在拆封前將整包回溫至室溫。