人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；M619價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱(chēng)  人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞,；M619價(jià)格
形態(tài)特性 多角

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)三株人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞C918,、M619和Mum-2B為同一遺傳背景，懷疑存在交叉污染,。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS,；20mM Hepes

傳代方法 1：

3傳代；3~4天1次,。  

傳代情況

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）　

STR Amelogenin：X,；CSF1PO：10，11,；D13S317：11,；D16S539：8，12,；D18S51：15,；D19S433：13，14,；D21S11：30,；D2S1338：24，25,；D3S1358：16,；D5S818：11，12,；D7S820：12,；D8S1179：13,；FGA：20，21,；TH01：8,，9.3；TPOX：11,；vWA：16,，17；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）,。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí),，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻,，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化,、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％,，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板,，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值,。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)
Anti-TNK1/FITC 熒光素標(biāo)記非受體型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

碳酸酐酶2抗體 Anti-CA Ⅱ 0.1ml

SEMA4B 英文名稱(chēng)： 跨膜蛋白SEMA4B抗體 0.2ml

E2F1 英文名稱(chēng)： 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser307) 磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格 0.1ml

CCL4/MIP-1 Beta(Macrophage Inflammatory Protein 1 beta) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CAP2 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDE4A8 磷酸二酯酶4A8抗體 規(guī)格 0.2ml

HA Kit Influenza 甲型流感 H1N1 (豬流感 2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對(duì)抗體 ELISA

THYN1 英文名稱(chēng)： 胸腺細(xì)胞核蛋白1抗體 0.1ml

phospho-c-Jun(Ser63) 英文名稱(chēng)： 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml

Anti-CAP2 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠Apelin大鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒,，英文名：AP13 ELISA KiISA Kit for Human Mu-type opioid receptor大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒,，英文名：Casp-9 ELISA KiISA Kit for Human Retrotransposon-derived protein PEG*鼠雌酮(E1)ELISA試劑盒，英文名：E1 ELISA KiISA Kit for Human Parathyroid hormone-related protein大鼠Toll樣受體2(TLR-2)ELISA試劑盒,，英文名：TLR-2 ELISA KiISA Kit for Human Reactive oxygen species modulator 1大鼠組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒,，英文名：H2B ELISA KiISA Kit for Human Sortilin-related receptor大鼠纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒，英文名：FPA ELISA KiISA Kit for Human Pigment epithelium-derived factor大鼠親環(huán)素B(CYPB)ELISA試劑盒,，英文名：CYPB ELISA Kit

人P5C脫氫酶(P5C dehydrogenase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒,，英文名：TNFsR-Ⅰ ELISA KiISA Kit for Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10B大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)ELISA試劑盒，英文名：MMP23B ELISA KiISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1大鼠淀粉樣蛋白β前體蛋白結(jié)合蛋白B3(APBB3)ELISA試劑盒,，英文名：APBB3 ELISA Kit大鼠γ-分泌激活蛋白(γSAP)ELISA試劑盒,，英文名：γSAP ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒,，英文名：OVA sIgE ELISA KiISA Kit for Human Axin-1小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)ELISA試劑盒，英文名：IGF-1R ELISA KiISA Kit for Human Alpha-1A adrenergic receptor小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒,，英文名：aFGF/FGF-1 ELISA Kit
廣譜非預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(5-250kDa) 2x250μl/100次 MBI原裝

ZNF474 英文名稱(chēng)： 鋅指蛋白474抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser213) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結(jié)合蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

phospho-DNA PKcs (Ser2612) 英文名稱(chēng)： 磷酸化DNA依賴(lài)性蛋白激酶抗體 0.1ml

EPHB2 EPHB2 / Hek5 兔單抗 (PE) Human
AFP-L2(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2) ELISA Kit 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HDAC7 組蛋白去乙?；?抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MK6 原活化蛋白激酶MKK6抗體 規(guī)格 0.1ml

ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit 人酸性磷酸酶 96T

ROR alpha 英文名稱(chēng)： 維相關(guān)孤兒受體α抗體 0.2ml

C1orf43 英文名稱(chēng)： 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 0.2ml

Anti-HDAC7 組蛋白去乙酰化酶7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml