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細(xì)胞凍存液的配方介紹

來源：普邁精醫(yī)科技（北京）有限公司 2025年05月30日 16:40

細(xì)胞凍存液是用于細(xì)胞冷凍保存的液體,，它能夠保護(hù)細(xì)胞在低溫下不受損傷,，尤其是在細(xì)胞凍結(jié)和解凍過程中,。凍存液通常包含保護(hù)劑,、緩沖液以及其他有助于維持細(xì)胞存活的成分,。以下是常用的細(xì)胞凍存液配方及其成分：

1.常見配方

配方1：基礎(chǔ)凍存液

DMSO（二甲基亞硫酰胺）：10%

FBS（胎牛血清）：90%

這種配方是簡單的凍存液,，DMSO作為常用的細(xì)胞保護(hù)劑，可以有效防止細(xì)胞在凍結(jié)時(shí)形成冰晶,，F(xiàn)BS提供了額外的保護(hù)和營養(yǎng)成分,。

配方2：改進(jìn)凍存液（適用于敏感細(xì)胞）

DMSO：5-10%

FBS：50-80%

PBS（磷酸鹽緩沖液）：10-20%

這種配方的凍存液減少了DMSO的濃度，適合對(duì)于DMSO較敏感的細(xì)胞,，F(xiàn)BS的比例保持較高,。

配方3：高濃度DMSO凍存液

DMSO：20%

FBS：70%

PBS：10%

這種配方適合對(duì)DMSO耐受性較好的細(xì)胞，能夠提供更強(qiáng)的保護(hù),。

2.凍存液的組成和作用

二甲基亞硫酰胺（DMSO）：作為細(xì)胞凍存液的主要保護(hù)劑,，DMSO可以防止細(xì)胞內(nèi)水分在低溫下結(jié)冰，減少冰晶對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞,。它的濃度通常在5%-20%之間,。

胎牛血清（FBS）：FBS中含有蛋白質(zhì)、脂肪,、維生素,、礦物質(zhì)等,，能夠?yàn)榧?xì)胞提供營養(yǎng)，增強(qiáng)凍存過程中的細(xì)胞生存率,。

PBS：用于維持凍存液的pH值和滲透壓,，確保細(xì)胞能夠在低溫環(huán)境下存活而不受損。

3.凍存步驟

制備凍存液：根據(jù)所用細(xì)胞的特點(diǎn)選擇合適的凍存液配方,。

離心與重懸：將細(xì)胞進(jìn)行離心,，然后將其重懸在凍存液中，確保細(xì)胞濃度適宜（通常為1-10×10^6個(gè)細(xì)胞/mL）,。

分裝：將細(xì)胞凍存液分裝到凍存管中,，確保每個(gè)凍存管中細(xì)胞量適當(dāng)。

緩慢冷凍：使用程序降溫設(shè)備將細(xì)胞緩慢降溫至-80°C,，一般每分鐘降溫1°C至-80°C,，再轉(zhuǎn)移至液氮保存。

存儲(chǔ)：將凍存管放入液氮中進(jìn)行長期保存,。

4.注意事項(xiàng)

DMSO濃度：DMSO濃度過高可能對(duì)細(xì)胞造成毒害,，因此應(yīng)根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的濃度。

緩慢冷凍：緩慢的冷凍過程能夠使水分緩慢結(jié)晶,，減少對(duì)細(xì)胞的傷害,。程序降溫儀器通常有內(nèi)建的逐步降溫程序。

解凍過程：解凍時(shí)要迅速進(jìn)行,，避免細(xì)胞長時(shí)間暴露在高濃度的DMSO中,，從而降低其存活率,。

通過適當(dāng)?shù)膬龃嬉号浞胶屠鋬鲞^程,，可以顯著提高細(xì)胞在凍存過程中的存活率，并確保它們?cè)诮鈨龊竽軌蚧謴?fù)正常功能,。

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