SILAC代謝標記定量實驗服務
參考價 | ¥ 500 |
訂貨量 | ≥1 件 |
- 公司名稱 上海研謹生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/1/2 11:41:14
- 訪問次數(shù) 2493
聯(lián)系方式:楊小姐13585717991 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
公司主營: 各種實驗代做:WB代做,,免疫組化,,PCR代做,細胞檢測,,食品安全檢測試劑,,獸藥殘留檢測試劑,動物疫病類檢測,,銷售高品質標準品,,對照品,ELISA試劑盒,,細胞,,血清,等等
產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
---|
SILAC代謝標記定量實驗服務
實驗技術簡介: SIL AC的基本原理是分別用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素(重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養(yǎng)基中相應氨基酸,,細胞經(jīng)5-6個倍增周期后,,穩(wěn)定同位素標記的氨基酸*摻入到細胞新合成的蛋白質中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數(shù)或蛋白量等比例混合,經(jīng)分離,、純化后進行質譜鑒定,,根據(jù)一級質譜圖中兩個同位 素型肽段的面積比較進行相對定量。屬于體內代謝標記法,。
實驗操作流程:
1,、蛋白提取和樣品制備
2、標記效率測試
3,、樣品混臺
4,、SDS-PAGE分級
5、酶解
6,、質譜鑒定
7,、軟件分析
8,、定性定量蛋白質組結果
9,、生物信息學數(shù)據(jù)挖掘和統(tǒng)計分析
實驗注意事項:
客戶提供:
1、蛋白質提取物: 濃度>1μg/ul, 蛋白質總量>300μg.
2,、細胞:通過細胞計數(shù)取不少于2x106個細胞于EP管,,加入0 5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-80°C,, 避免反復凍融),。
交付標準:
1、蛋白質鑒定和SIL AC定量分析結果;
2,、客戶蛋白質對應的質譜峰圖;
3,、SIL AC實驗完整的實驗步驟、使用儀器,、軟件檢索參數(shù)等,。
其他:
1、SILAC是體內標記技術,,穩(wěn)定同位素標記的氨基酸與天然氨基酸化學性質基本相同,,所標記的細胞和未標記細胞在生物學行為上幾乎沒有差異,標記效率可高達100%,。
2,、采用質譜定量,定量結果準確且批次變異小、重復性好,。
3,、體內代謝標記與SDS- PAGE或色譜分離技術相結合,兼容疏水性蛋白和偏堿性蛋白,,不受蛋白性質限制,。
4、多個樣品混合后同時進行分離、酶切和鑒定,后續(xù)實驗對樣品的影響一致,, 減少了實驗操作和儀器設備產(chǎn)生的影響,。
5、由于該技術屬于體內標記,,標記效果穩(wěn)定,,其標記效率不受裂解液的影響,不僅適合于進行全細胞蛋白的分析,,還適合于膜蛋白的鑒定和定量,。
6、與化學標記相比,,SIL AC方法蛋白需要量明顯減少,,通常每個樣品只需要幾十微克的蛋白量。
7,、活體標記,,更接近樣品真實狀態(tài)。
8,、只適用于活體培養(yǎng)的細胞,,對于生物醫(yī)學研究中常用的組織樣品,體液樣品等無法分析,對于動物模型的標記成本太大,,無法實現(xiàn),。與體外標記技術相比,SIL AC屬于體內標記,,具有以下技術優(yōu)勢
1,、高通量,可同時鑒定并定量數(shù)百至數(shù)千種蛋白質;
2,、定量精確,,降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異;
3、線性定量范圍廣;
4,、靈敏度更高,,蛋白質需要量明顯減少;
5、標記采用的是體內標記技術,,更接近樣品真實狀態(tài),。
SILAC技術服務內容
1、細胞同位素標記;
3,、SDS-PAGE分離;
4,、胰酶酶切后液相分離和質譜分析;
5、數(shù)據(jù)庫檢索及蛋白質定量分析;
6,、差異蛋白的生物信息學分析;
7,、實驗報告提交。
實驗服務報告內容
1、蛋白定鑒定和SIL AC定量分析結果;
2,、顧客蛋白質對應的質譜峰圖;
3,、SIL AC實驗完整的實驗步驟、使用儀器,、軟件檢索參數(shù)等,。
技術服務優(yōu)勢
1、靈敏度高,,檢測限低,,可檢測出低豐度蛋白;
2、分離能力強,,分析范圍廣,,iITRAQ可以對任何類型的蛋白質進行分離鑒定,包括高分子量蛋白質,、酸性蛋白和堿性蛋白,,膜蛋白和不溶性蛋白;
3、高通量:同時對8個樣本進行分析,,提高了實驗通量,,可同時對多個時間點或不同處理的蛋白質進行分析;
4,、結果可靠:定性與定量分析結果更加可靠;
5,、自動化程度高:液相與質譜連用,自動化操作,,分析速度快,,分離效果好。
實驗代做服務:
| |||
| |||
| |||
| |||