大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)

Hu人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)

4 保溫 在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation),，有人稱之為孵育,，在ELISA中似不恰當(dāng)。 ELISA屬固相免疫測定,，抗原,、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,，加入板孔中的標(biāo)本,，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸,。這是一個逐步平衡的過程,，因此需經(jīng)擴散才能達到反應(yīng)的終點,。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此,。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。

ELISA中的試劑（3）－酶的底物3.3 　酶的底物 3.3.1 　HRP的底物 HRP催化過氧化物的氧化反應(yīng),，代表性的過氧化物為H2O2,，其反應(yīng)式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2為供氧體,，H2O2為受氫體,。在ELISA中，DH2一般為無色化合物,，經(jīng)酶作用后成為有色的產(chǎn)物,，以便作比色測定。常用的供氫體有鄰苯二胺(O-phenylenediamine, OPD),、四甲基聯(lián)苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, TMB)和ABTS[2,2'-azino-di-(3- ethylbenziazobine sulfonate-6)],。

兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)

大鼠維生素B6(VB6)

Hu人抗透明帶抗體(aZP)

Hu人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)

Human 5-lipoxygenase,5-LO/LOX ELISA Kit

Hu人血清白蛋白(HSA)

Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit

Pig豬磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)

大鼠維生素C(VC)

Hu人絲?血球凝集素(FHA)

Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit

Hu人MAX二聚化蛋白1(mxd1)

Mo小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)

Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA Kit

3.6　陽性對照品和陰性對照品陽性對照品(positive control)和陰性對照品(negative control)是檢驗試驗有效性的控制品，同時也作為判斷結(jié)果的對照,，因此對照品,，特別是陽性對照品的基本組成應(yīng)盡量與檢測標(biāo)本的組成相*。以人血清為標(biāo)本的測定,，對照品也為人血清,，因為正常人血清在各種ELISA模式中可產(chǎn)生不同程度的本底。由于大量正常人血甭較難得到,，國外試劑盒中的對照品多以復(fù)鈣人血漿(recalcified human plasma)為原料,，即在血漿中加入鈣離子,，使其中的纖維蛋白質(zhì)凝固，除去凝塊后所得的液體,，其組成與血清相似,。陰性對照品須先行檢測，確定其中不含待測物質(zhì),。例如HBsAg檢測的陰性對照品中不可含HBsAg,，抗HBs也是陰性。陽性對照品多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì),，其中加入一定量的待檢物質(zhì),，此量在試劑說明書中標(biāo)明。加入的量應(yīng)與試劑的敏感度相稱,，在測定中得到的吸光值與受檢標(biāo)本吸光值比較,，可對標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量有一個粗略的估計。國外檢測HBsAg的ELISA試劑盒檢測敏感度約為0.5ng/ml,，陽性對照品中含量約為10ng/ml,。在對照品中一般加入抗生素和防腐劑，以利保存,。