AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞)說明書
- 公司名稱 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2019/8/1 13:39:35
- 訪問次數(shù) 770
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/瓶 |
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貨號(hào) | GOY-X0585 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅用于科研 |
公司向您推薦細(xì)胞的詳細(xì)說明:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
AsPC-1 (human pancreatic cancer cell line) | 5×105cells/瓶 |
產(chǎn)品名稱:AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞)說明書
英文名稱:AsPC-1 (human pancreatic cancer cell line)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):GOY-X0585
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,,同時(shí),可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué)、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,,參與血管壁的炎癥反應(yīng),。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1)主動(dòng)脈硬化,。
(2)主動(dòng)脈瘤
(3)主動(dòng)脈鈣化,。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色,。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml,。
(5)肌動(dòng)蛋白,,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取
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