Anip973細(xì)胞,,人肺腺癌細(xì)胞株
參考價(jià) | ¥ 13 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 上海慧穎生物科技有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 國(guó)外引進(jìn)
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/8/14 12:14:41
- 訪問(wèn)次數(shù) 2358
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關(guān)鍵詞:慧穎生物提供高品質(zhì)Anip973細(xì)胞,,人肺腺癌細(xì)胞株,,狀態(tài)良好,傳代次數(shù)靠前,,*,!
產(chǎn)品名稱:Anip973細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞株
規(guī)格:凍存管/25T培養(yǎng)瓶
貨期:10個(gè)工作日左右
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):無(wú)支原體,,無(wú)污染
上?;鄯f生物提供4000多種類細(xì)胞株細(xì)胞系,從源頭把控產(chǎn)品的可靠性,,復(fù)蘇,,凍存,傳代,,培養(yǎng),,嚴(yán)格無(wú)菌操作,全國(guó)各地均可發(fā)貨,,遠(yuǎn)到香港,,澳門,內(nèi)蒙古,,新疆石河子,,寧夏,海南等地,,全國(guó)訂購(gòu):,!
原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),,否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大,,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng),。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng),。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,,易于保存,,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代Anip973細(xì)胞,,人肺腺癌細(xì)胞株形成細(xì)胞株的zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,,便于實(shí)驗(yàn)。1. 操作步驟(1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,。(2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量,。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜。(3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮,、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化,。(4)吸出消化液,,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,,把殘留消化液沖掉,,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,,在吸除胰蛋白液后,,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化,。(5)使用彎頭吸管,,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液,。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞,。(6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),。(7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液,。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液,。2. 注意事項(xiàng)(1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間,,消化時(shí)間過(guò)短時(shí),細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,,過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落,、損傷。(2)掌握好消化濃度,,當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí),,消化時(shí)間應(yīng)縮短,過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng),。三,、體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟1. 瘤細(xì)胞懸液接種(1)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞,。 (2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液,。(3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍。(4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml,。(5)常規(guī)消毒后,,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞),。初次接種成功率低,,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些。(6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況,。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期,,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,zui后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間,。2. 腹水瘤的建立與腹水瘤的接種 將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔,、腹壁或其他部位,引起腹水,,腹水中含有瘤細(xì)胞,,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤,。初次傳代時(shí),,腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色,。腹水瘤的接種過(guò)程如下,。(1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),。(2)消毒動(dòng)物,,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞。(3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,,待小鼠腹部明顯膨大,。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號(hào)針頭抽取腹水,,也可行腹部解剖后,,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml,。(4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩K摹⑴囵B(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的,。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融,。1. 凍存細(xì)胞(1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染),在凍存前1d換液,。(2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×107/ml左右密度,,離心,,去上清。(3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,,小牛血清2ml,,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),,按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外,。(4)分裝于無(wú)菌凍存管中,每管加1.5m懸液,。(5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,,做好標(biāo)記,。(6)凍存:在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中,,按-1℃/min的速度,,在30~40min時(shí)間內(nèi),,下降到液氮表面,再停30min后,,直接投入液氮中,。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,,太慢則促進(jìn)冰晶形成,。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷,。2. 復(fù)蘇細(xì)胞(1)從罐中取出凍存管,。(2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時(shí)搖動(dòng),,使其急速融化,,30~60s內(nèi)完成。(3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,,打開(kāi)蓋子,,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液,。(4)低速離心(500~1000r/min) 5min,,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次,。(5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),,次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng),。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng),。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到107/ml,,在融后稀釋20倍時(shí),,仍能保持5×105/ml數(shù)量。
ELISA試劑盒,,抗原抗體,,細(xì)胞株細(xì)胞系,胎牛血清,,標(biāo)準(zhǔn)菌株,,試劑耗材,SIGMA期貨試劑,,人AB血清,,GIBCO羊水培養(yǎng)基.............慧穎生物熱賣中Anip973細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞株
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SUER1215(XR) Hs 683細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1216(XR) Hs 688(A).T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1217(XR) Hs 695T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1218(XR) Hs 698.T細(xì)胞,,腺癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1219(XR) Hs 706.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1220(XR) Hs 729細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1221(XR) Hs 737.T細(xì)胞,,巨細(xì)胞瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1222(XR) Hs 739.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1223(XR) Hs 742.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1224(XR) Hs 746T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1225(XR) Hs 751.T細(xì)胞,霍奇金淋巴瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1226(XR) Hs 766T細(xì)胞,,導(dǎo)管癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1227(XR) Hs 819.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1228(XR) Hs 821.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1229(XR) Hs 822.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1230(XR) Hs 834.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1231(XR) Hs 839.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1232(XR) Hs 840.T細(xì)胞,,刺瘤,,乳突淋瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1233(XR) Hs 852.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1234(XR) Hs 863.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1235(XR) Hs 870.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1236(XR) Hs 888.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1237(XR) Hs 895.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1238(XR) Hs 934.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1239(XR) Hs 936.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1240(XR) Hs 939.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1241(XR) Hs 940.T細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1242(XR) Hs 944.T細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1243(XR) HSC-2細(xì)胞,,鱗狀細(xì)胞癌,,扁平上皮癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1244(XR) HSC-3細(xì)胞,鱗狀細(xì)胞癌,,扁平上皮癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1245(XR) HSC-4細(xì)胞,,鱗狀細(xì)胞癌,扁平上皮癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1246(XR) HT細(xì)胞,B細(xì)胞淋巴瘤不明細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1247(XR) HT-1080細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1248(XR) HT115細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1249(XR) HT-1197細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1250(XR) HT-1376細(xì)胞,,移行細(xì)胞癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1251(XR) HT-144細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1252(XR) HT-29細(xì)胞,腺癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1253(XR) HT55細(xì)胞,,腺癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1254(XR) HTK-細(xì)胞,,漿細(xì)胞骨髓瘤 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1255(XR) HuCCT1細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1256(XR) HuG1-N細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1257(XR) huH-1細(xì)胞,,肝癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1258(XR) HuH28細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xì)胞,,肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1260(XR) HuH-7細(xì)胞,,肝癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1261(XR) HuNS1細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xì)胞,,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1265(XR) HuT 78細(xì)胞,,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1266(XR) HuTu 80細(xì)胞,腺癌,;惡性腺瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1267(XR) IA-LM細(xì)胞,,大細(xì)胞癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1268(XR) IGR-1細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1269(XR) IGR-37細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1270(XR) IGR-39細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1271(XR) IGROV1細(xì)胞,惡性腫瘤,,腺癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1272(XR) IM95細(xì)胞,,腸腺癌學(xué)校細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1273(XR) IMR-32細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1274(XR) IOMM-Lee細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1275(XR) IPC-298細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1276(XR) Ishikawa (Heraklio) 02 ER-細(xì)胞,星形細(xì)胞瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1277(XR) IST-MES1細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1278(XR) IST-MES2細(xì)胞,, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1279(XR) J82細(xì)胞,移行細(xì)胞癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1280(XR) JeKo-1細(xì)胞,,套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1281(XR) JH-EsoAd1細(xì)胞,,巴列特食管炎相關(guān)腺癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1282(XR) JHH-1細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
Anip973細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞株接種或傳代以后,,實(shí)驗(yàn)者每天或至多間隔1~2d,,要對(duì)細(xì)胞做常規(guī)性檢查。觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)情況以及培養(yǎng)的pH變化,、有無(wú)污染等,。根據(jù)細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化,做換液或傳代處理,,如發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)及時(shí)采取措施,。1. 細(xì)胞形態(tài) 生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞,在一般顯微鏡下觀察時(shí)可見(jiàn),,細(xì)胞透明度大,、折光性強(qiáng)、輪廓不清,。細(xì)胞生長(zhǎng)不良時(shí),,輪廓增強(qiáng),胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡,、脂滴和其他顆粒狀物,,細(xì)胞之間空隙加大,細(xì)胞形態(tài)可變得不規(guī)則甚至失去原有特點(diǎn),,如上皮細(xì)胞變成類上皮細(xì)胞等,。某些染料當(dāng)細(xì)胞死亡時(shí)能透過(guò)變性的胞膜與解體的細(xì)胞核DNA結(jié)合,而令其著色,。因而常用臺(tái)盼藍(lán)(trypan blue) 鑒別細(xì)胞死活,,活細(xì)胞不著色,死細(xì)胞核呈藍(lán)色,。2. 細(xì)胞生長(zhǎng) 初代培養(yǎng)或傳代的細(xì)胞懸液接種以后,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)短不同的潛伏期后開(kāi)始增殖。傳代細(xì)胞系,、胚胎組織或幼體組織一般在第二天即可見(jiàn)細(xì)胞生長(zhǎng),,一周內(nèi)便可連接成片。接種細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶壁后,,應(yīng)及時(shí)做再培養(yǎng),。否則由于營(yíng)養(yǎng)物消耗和代謝積累,細(xì)胞即進(jìn)入停止期或退化期,。此時(shí)細(xì)胞輪廓增強(qiáng),,細(xì)胞內(nèi)常出現(xiàn)顆粒狀堆積物,為膨脹的線粒體,,細(xì)胞質(zhì)呈空泡化,,細(xì)胞變圓、粗糙,嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞從瓶壁脫落,,只有及時(shí)再做傳代處理,,才能使細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖。3. 營(yíng)養(yǎng)液 正常情況下,,培養(yǎng)液呈桃紅色,。如果細(xì)胞維持在pH6.5~6.6條件下,細(xì)胞會(huì)脫落死亡,。當(dāng)培養(yǎng)液酸化變黃時(shí),,說(shuō)明培養(yǎng)液中代謝產(chǎn)物已堆積到一定量,需要更換新鮮培養(yǎng)液,。培養(yǎng)液中如加Hepes或用5%CO2溫箱培養(yǎng)可使pH維持相對(duì)穩(wěn)定,。更換營(yíng)養(yǎng)液的時(shí)間,可依營(yíng)養(yǎng)物的消耗而定,,細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛時(shí)2~3d換一次,,生長(zhǎng)緩慢時(shí),3~4d亦可,。要特別注意各種細(xì)胞對(duì)pH值要求是不一樣的,。4. 微生物污染 微生物污染培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)物后會(huì)出現(xiàn)pH值改變,培養(yǎng)液呈現(xiàn)混濁狀,。細(xì)菌感染后,,由于細(xì)菌的運(yùn)動(dòng),光鏡觀察可見(jiàn)有微閃光,;真菌感染則在鏡下見(jiàn)許多細(xì)絲狀菌絲,有時(shí)還密集有群集孢子,;支原體的污染需要借助一些檢測(cè)手段才可檢出,。細(xì)胞污染以后一般應(yīng)當(dāng)廢棄,對(duì)于重要的細(xì)胞株,,可以參考相關(guān)專著,,介紹采取一些措施清除污染。比較重要的實(shí)驗(yàn),、珍貴的細(xì)胞,,至少由兩個(gè)實(shí)驗(yàn)人員獨(dú)立培養(yǎng)操作,或由一個(gè)人分次(不同時(shí))操作,。除培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生條件外,,空氣中的濕度與微生物污染關(guān)系密切。重要的,、周期長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)盡量安排在空氣濕度低的秋冬季進(jìn)行,。