使用對象

IAC-SEP^®*總量免疫親和柱能夠特異性的純化與濃縮樣品中的*B1,。*免疫親和柱廣泛地應(yīng)用于糧食、食品,、飼料,、堅果、花生,、醬油,、醋、辣椒,、胡椒,、藥材和酒類等樣品的提取，該方法速度快,、操作簡單,、準(zhǔn)確性高，對準(zhǔn)確靈敏的測定樣品中中的*B1起到十分重要的作用,。

IAC-SEP^®*B1免疫親和柱適用于以下標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T 18979-2003 食品中*的測定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法

SN/T 1101-2002 進出口油籽及糧谷中*的檢測方法

原理

樣品經(jīng)甲醇+水提取液提取,、過濾、稀釋,，然后通過鍵合有*B1特殊抗體的免疫親和柱,。此時，*被親和柱中的抗體特異性的吸附,，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去,，然后用甲醇使抗體變性，從而將*B1從親和柱上洗脫下來,。zui后,，用HPLC或熒光計進行定量檢測。

儲存條件

該親和柱保存在2-8 °C條件下，不能冷凍,，保質(zhì)期為18個月,。建議在室溫（18-30°C）下使用。

實驗溶液制備

提取液,，甲醇/水（8+2）：取80mL甲醇加20mL水,，混合均勻。

        甲醇/水（7+3）：取70mL甲醇加30mL水,，混合均勻,。

HPLC流動相，甲醇/水（45+55）：取450mL甲醇加550mL水,，混合均勻,，用0.22微米的尼龍篩過濾。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取*B1儲備液,，流動相為稀釋液,，配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。            

   注：配制好的標(biāo)準(zhǔn)品溶液2-8℃冷藏保存有效期為24h,。

pH 7.0 PBS溶液：稱取8.0g氯化鈉,，1.44g磷酸氫二鈉，0.24g磷酸二氫鉀,，0.2g氯化鉀,，用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0,，zui后用純水稀釋至1000mL,。

0.1%的吐溫/PBS：將1.0mL吐溫-20加入到1L pH 7.0 PBS溶液中，混勻,。

液相色譜條件

色譜柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

流動相：甲醇-水（45+55,，v/v）

流速：0.8mL/min

檢測器：熒光檢測器，激發(fā)波長360nm,發(fā)射波長440nm

進樣體積：20~100uL

光化學(xué)衍生化系統(tǒng)：光化學(xué)衍生器（連接于色譜柱后,，然后通向熒光檢測器）