色譜柱固定相填充方法與技巧
- 公司名稱 武漢泰特沃斯科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2017/12/5 15:31:54
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色譜柱固定相填充方法與技巧
色譜柱在色譜儀分析檢測(cè)過(guò)程中起著分離樣品組分的作用,,其分離度直接影響色譜儀檢測(cè)的靈敏度和速率。影響色譜柱分離度的因素包括固定相和流動(dòng)相的選擇,、流速和溫度的控制,、理論塔板高度和塔板數(shù),、對(duì)稱因子、容量因子和選擇性因子的重復(fù)性,。其中,,組分在色譜柱上的分離效果,主要取決于用在填充色譜柱的固定相。
色譜柱固定相填充方法與技巧
固定相填充質(zhì)量的好壞直接影響填充柱的柱效,,因此,,色譜柱固定相的填充方法也是很重要的。一根填充質(zhì)量較高的色譜柱,,通常其理論塔板數(shù)應(yīng)該達(dá)到2000-3000/m,,根據(jù)填充物粒度的大小,可分為濕法裝柱和干法裝柱,。
濕法裝柱是先把硅膠用適當(dāng)?shù)娜軇┌鑴蚝?,再填入柱子中,然后再加壓用淋洗?走柱子",,本法zui大的優(yōu)點(diǎn)是一般柱子裝的比較結(jié)實(shí),,沒有氣泡。
干法裝柱則是直接往柱子里填入硅膠,,然后再輕輕敲打柱子兩側(cè),,至硅膠界面不再下降為止,然后再填入硅膠至合適高度,,zui后再用油泵直接抽,,這樣就會(huì)使得柱子裝的很結(jié)實(shí)。接著是用淋洗劑"走柱子",,一般淋洗劑是采用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一倍后的溶劑,。
濕法裝柱和干法裝柱這二者各有優(yōu)劣,不論干法還是濕法,,硅膠(固定相)的上表面一定要平整,,并且硅膠(固定相)的高度一般為15cm左右,太短了可能分離效果不好,,太長(zhǎng)了也會(huì)由于擴(kuò)散或拖尾導(dǎo)致分離效果不好,。為了獲得*的填充密度,可選擇適當(dāng)?shù)募訅?、減壓或是手工填充的方法進(jìn)行填充色譜柱,。