小鼠Ⅰ型膠原ColⅠ試劑盒

小鼠Ⅰ型膠原ColⅠ試劑盒必須為液體,，不含沉淀,。包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿,。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。

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供應商 :拜力生物

貨期 :7-10天

◇      血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心,。

◇      血漿：應根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。如有沉淀形成,，應再次離心。

◇      尿液,、胸腹水,、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應再次離心,。

◇      細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫,，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,，避免交叉污染,。

2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品,，酶結合物或底物時,，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育"時間,，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性,。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數(shù)量多,，推薦使用多道移液器加樣,。

3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,，酶標板加上蓋或覆膜,，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作,，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度,。

4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,，同時要消除板底殘留的液體和手指印,，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。

5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。標準品、檢測溶液A工作液,、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆,。請確配置標準品及工作液,，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差,；請勿重復使用已稀釋過的標準品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,，每隔10分鐘),，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù),。

7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射,。

建議檢測樣品時均設雙孔測定,，以保證檢測結果的準確性。

如標本中待測物質含量過高,，請先稀釋后再測定,，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。