搖蚊金屬硫蛋白(MT)操作步驟
參考價(jià) | ¥ 1800 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱(chēng) 上海雅吉酶聯(lián)生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 美國(guó)TSZ
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2017/4/3 1:51:43
- 訪問(wèn)次數(shù) 496
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搖蚊金屬硫蛋白(MT)操作步驟,,該試劑盒有兩種規(guī)格48T和96T,4℃左右保存,,包郵,。
另我公司可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),。客戶(hù)只需把樣本作好標(biāo)記,,包裝中多放干冰或者冰袋,,快遞運(yùn)送至我公司即可,我公司收到樣本三天左右即可出結(jié)果,。歡迎廣大客戶(hù),。
搖蚊金屬硫蛋白(MT)操作步驟,部分如下:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋,。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔,、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,
然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡
量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘,。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,,靜置30 秒后棄去,如此
重復(fù)5 次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行,。
我公司還有該試劑盒:,,的免疫組化試劑盒,如有需要,,歡迎,。
石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr,;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ,、Ⅱ、Ⅲ),,每次
10 min,;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,,95%乙醇2 次(每次2min),,85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×2min,;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)*方法進(jìn)行抗原修復(fù),,常采用高壓、微波(溫
度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,,室溫自然冷卻,,自來(lái)水沖洗,ddH2O 洗2×
2min,,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見(jiàn)附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),,
直接進(jìn)入第5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑B,,37℃濕盒孵育30 min,;
6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃一夜,;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),;
8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min,;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),,37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),;
11.封閉: 滴加試劑Tween 20,,37℃濕盒孵育封閉20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用試劑C 稀釋的試劑E(1:50~200,,終濃度5~20 nM),,37
℃濕盒中孵育30 min,;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min),;
14.顯色:應(yīng)用DAB 溶液(試劑F)顯色,;
15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,,脫水,,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,,用試劑緩沖甘油封固劑封片,;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
搖蚊金屬硫蛋白(MT)
搖蚊熱休克蛋白70(HSP-70)
搖蚊乙酰膽堿酯酶(AchE)
搖蚊谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)
搖蚊過(guò)氧化物酶(POD)
搖蚊細(xì)胞色素P4501A1(CYP4501A1)
搖蚊羧酸酯酶(CES)
大菱鲆Turbot熱休克蛋白-70(HSP70)