人類似60S核糖體蛋白L21試劑盒

我司人類似60S核糖體蛋白L21試劑盒細(xì)胞近3000種,，來(lái)源于美國(guó)ATCC,細(xì)胞都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)量控制,，在中國(guó)大陸努力搭建正牌細(xì)胞與國(guó)內(nèi)廣大科研人員之間的溝通橋梁，還有更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,，標(biāo)準(zhǔn)品,，細(xì)胞株和實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等前期后續(xù)服務(wù)。

細(xì)胞株

　　Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好,？還是冷凍好,？

　　要冷藏??！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變,，溶液往往變堿,，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年,。

　　Q3.細(xì)胞計(jì)數(shù)及存活測(cè)試
1、原理：
(1)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目可用血球計(jì)數(shù)盤或是Coultercounter粒子計(jì)數(shù)器自動(dòng)計(jì)數(shù),。
(2)血球計(jì)數(shù)盤一般有二個(gè)chambers,，每個(gè)chamber中細(xì)刻9個(gè)1mm2大正方形，其中4個(gè)角落之正方形再細(xì)刻16個(gè)小格,，深度均為0.1mm,。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后，每個(gè)大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml,。使用時(shí),，計(jì)數(shù)每個(gè)大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目，乘以稀釋倍數(shù),，再乘以104,，即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目。
(3)存活測(cè)試之步驟為dyeexclusion,，利用染料會(huì)滲入死細(xì)胞中而呈色,，而活細(xì)胞因細(xì)胞膜完整，染料無(wú)法滲入而不會(huì)呈色,。一般使用藍(lán)色之trypan blue染料,，如果細(xì)胞不易吸收trypan blue，則用紅色之Erythrosin bluish,。計(jì)算細(xì)胞活率：活細(xì)胞數(shù)/(活細(xì)胞數(shù)+死細(xì)胞數(shù))×100%,。計(jì)數(shù)應(yīng)在臺(tái)盼蘭染色后數(shù)分鐘內(nèi)完成，隨時(shí)間延長(zhǎng),，部分活細(xì)胞也開(kāi)始攝取染料;因?yàn)榕_(tái)盼蘭對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的親和力,，用不含血清的稀釋液,，可以使染色計(jì)數(shù)更為準(zhǔn)確。

　　Q4.細(xì)胞特性
在細(xì)胞培養(yǎng)之前,，我們要了解一下你所要養(yǎng)細(xì)胞的基本特性,，這點(diǎn)可以從細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書或者從ATCC細(xì)胞庫(kù)查詢。除此之外我們還要知道每管細(xì)胞的數(shù)量,，建議分裂或傳代的比例,，和已知細(xì)胞的傳代代次等信息。

　　Q5.準(zhǔn)備培養(yǎng)基
復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)需要準(zhǔn)備合適的培養(yǎng)基,，血清和細(xì)胞生長(zhǎng)所需的添加劑,。大部分培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)體系，可以在訂購(gòu)細(xì)胞系時(shí)獲得,。
雖然大多數(shù)細(xì)胞系可以在不止一種培養(yǎng)基中生長(zhǎng),，但是當(dāng)培養(yǎng)基改變時(shí)，細(xì)胞的性質(zhì)也會(huì)變化,。因此,，使用細(xì)胞庫(kù)推薦的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)獲得的效果。

　　Q6.開(kāi)啟凍存管
1.準(zhǔn)備一個(gè)培養(yǎng)瓶,，加入適宜細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,，液體體積按照說(shuō)明書的推薦配置，并平衡培養(yǎng)基的溫度和pH（CO2）,?！?br/>2.在37℃水浴中或細(xì)胞的正常生長(zhǎng)溫度下將凍存管輕輕搖動(dòng)。解凍要快,，約2分鐘或直到冰晶融化即可,。
3.從水浴中取出凍存管并用浸泡或噴灑70%乙醇的方式來(lái)消毒。進(jìn)一步的操作均需在無(wú)菌操作臺(tái)中嚴(yán)格無(wú)菌條件下進(jìn)行,。
4.擰開(kāi)凍存管的管帽并將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到一個(gè)含有9 ml推薦培養(yǎng)基的無(wú)菌離心管中,。通過(guò)溫和離心（125×g 10 min）除去冷凍保護(hù)劑（DMSO）。棄去上清,，并用1或2 ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。將這些細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中并輕輕搖動(dòng)以*混勻。
5.培養(yǎng)24小時(shí)后檢查細(xì)胞狀態(tài)并在需要時(shí)進(jìn)行傳代,。

　　Q7. 培養(yǎng)用液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

　　由于,，大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4，偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響,。各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同,，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差，無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng),。

　　但總體來(lái)說(shuō),，細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,，偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長(zhǎng)。因此,，我們?cè)谂渲婆囵B(yǎng)用液時(shí),，可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。液體在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí),，溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右,。