Human Mesothelin ELISA Kit

Human Mesothelin ELISA Kit樣品收集,、處理及保存方法：血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。檢測對象:人血清/血漿及相關液體實驗方法:雙抗原夾心法進行測

ELISA試劑分類: RD試劑盒,，GBD試劑盒,，IBL試劑盒

  2、 血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
  3,、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4,、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

上海乾思生物科技代理**進口試劑盒,，經銷眾多生命科學領域的ELISA試劑盒,，生化試劑，標準品,，抗體,，培養(yǎng)基，血清,，為中國科研試劑供應商之一,，質量被全國各大院校科研機構認可,，
并為Elisa試劑盒長期供應商.

上海乾思生物科技有限公司特別供應進口分裝elisa檢測試劑盒,，規(guī)格48T/96T，2-8℃保存,，快遞運輸,。上海乾思生物成立于2007年，生產經營進口分裝的試劑盒產品,，有人試劑盒,、大鼠試劑盒、小鼠試劑盒,、雞試劑盒,、鴨試劑盒、豚鼠試劑盒,、牛試劑盒,、兔子試劑盒、羊試劑盒,、山羊試劑盒,、綿羊試劑盒、魚試劑盒,、豬試劑盒,，并且提供試劑盒代測技術服務等。

乾思生物科技有限公司

Shanghai biobaiye Biotech Co.,Ltd

供應人elisa試劑盒,、大鼠elisa試劑盒,、小鼠elisa試劑盒、兔elisa試劑盒等,。標本有：血清,、血漿、細胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。

種屬：人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。

常用生化試劑作用：   

1、蛋白酶K：能水解消化蛋白質,，特別是與DNA結合的組蛋白,，在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,，推薦反應緩沖液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2,。

2、SDS：十二烷基硫酸鈉,，溶解細胞膜上的脂類與蛋白質,，因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜，并解離細胞中的核蛋白,，SDS 還能與蛋白質結合而沉淀,。

3、IPTG：異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,， 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導的細菌內的蛋白表達等,。IPTG和乳糖的結構相似，所以它和乳糖一樣,，可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結合,，

使阻遏蛋白的空間構像變化，四聚體解聚成單體,，失去與操縱子特異性結合的能力，從而解除了阻遏蛋白的作用,，使其后的基因得以轉錄合成利用乳糖的酶類,。與乳糖不同的是,，

IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選,。作用*的誘導劑,，不被細菌代謝而十分穩(wěn)定。

4,、X-gal：5-溴-4-氯,。

樣品收集、處理及保存方法：血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內毒素的試管,。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。檢測對象:人血清/血漿及相關液體實驗方法:雙抗原夾心法進行測

ELISA試劑分類: RD試劑盒,，GBD試劑盒，IBL試劑盒

  2,、 血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
  3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
  4,、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。
不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

上海乾思生物科技代理**進口試劑盒,，經銷眾多生命科學領域的ELISA試劑盒，生化試劑,，標準品,，抗體，培養(yǎng)基,，血清,，為中國科研試劑供應商之一，質量被全國各大院?？蒲袡C構認可,，
并為Elisa試劑盒長期供應商.

上海乾思生物科技有限公司特別供應進口分裝elisa檢測試劑盒,，規(guī)格48T/96T，2-8℃保存,，快遞運輸,。上海乾思生物成立于2007年，生產經營進口分裝的試劑盒產品,，有人試劑盒,、大鼠試劑盒、小鼠試劑盒,、雞試劑盒,、鴨試劑盒、豚鼠試劑盒,、牛試劑盒,、兔子試劑盒、羊試劑盒,、山羊試劑盒,、綿羊試劑盒、魚試劑盒,、豬試劑盒,，并且提供試劑盒代測技術服務等。

乾思生物科技有限公司

Shanghai biobaiye Biotech Co.,Ltd

供應人elisa試劑盒,、大鼠elisa試劑盒,、小鼠elisa試劑盒。

注：
1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫,，使用后請立即按照說明書要求保存試劑,。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染,。
2.   加樣：加樣或加試劑時,，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時,，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性,。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣,。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā),，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā),；洗板后應盡快進行下步操作,，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印,，避免影響后的酶標儀讀數,。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。標準品,、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,，并使用相應的稀釋液配制,，不能混淆。請確配置標準品及工作液,，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差,；請勿重復使用已稀釋過的標準品,、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,，每隔10分鐘),，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數,。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定,，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高,，請先稀釋后再測定,，計算時請后乘以稀釋倍數。
洗板方法
1.  手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,，浸泡1-2分鐘,，根據需要，重復此過程數次。
2.  自動洗板：如果有自動洗板機,，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
計算
  以標準物的濃度為縱坐標(對數坐標)，OD值為橫坐標(對數坐標),，在對數坐標紙上繪出標準曲線,。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析，如curve expert 1.3,，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,，再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數,，即為樣品的實際濃度,。
 ◇      注意事項：
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復凍融,。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月,。部分標本需添加抑肽酶。