Caspase-3是凋亡過程中zui主要的終末剪切酶,，因而也是研究zui多的caspase,，它激活pro-caspase-2,6,7,9等，特異水解多種凋亡關鍵蛋白如PARP,，介導細胞核染色質(zhì)固縮,、凋亡小體生成、核DNA斷裂,。試劑盒測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide （Ac-DEVD-pNA）,，釋放硝基苯胺pNA。游離硝基苯胺pNA呈黃色在405 nm具有zui大吸收峰,，用普通可見光分光光度比色方法測定,。根據(jù)pNA標準管吸光度OD值和標準曲線，計算來自底物肽釋放的pNA濃度,，得到Caspase-3水解活性,。反應體系100微升，試劑盒提供的試劑,，除標準曲線外可進行50或100次樣品測定,。

適用：測定哺乳動物組織、細胞caspase-3活性,。

組成與儲存：
1. 裂解緩沖液： 30 ml ,，4 ºC
2. 反應緩沖液： 20 ml ，4 ºC
3. 2 mM Ac-DEVD-pNA底物： 0.5 ml,，－20 ºC避光
4. 10 mM pNA標準品： 0.5 ml,，－20 ºC避光
以上標出的量為100次檢測，50次檢測的試劑量減半,。試劑常溫運輸,。到達后按要求儲存，1年內(nèi)穩(wěn)定,。

所需儀器：
酶標儀與96孔酶標板,；或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。
工作波長：zui大吸收波長405 nm,，如不具備也可在400~450 nm范圍內(nèi)測定,。