在腫瘤治療領(lǐng)域,，化療作為一種傳統(tǒng)和重要的治療手段,，主要是通過化學(xué)藥物殺滅腫瘤細(xì)胞達(dá)到治療的目的,。然而,，由于其非特異性的殺傷作用引起的不良反應(yīng)一直是患者和醫(yī)療人員的難題,。隨著基因靶點(diǎn)研究的不斷深入,，腫瘤治療的靶向藥物應(yīng)運(yùn)而生,，目標(biāo)明確的治療方式給患者帶來更好治療效果的同時也表現(xiàn)出更輕的藥物副反應(yīng),，因此在臨床上獲得更廣泛的應(yīng)用場景,。替尼類藥物就是典型的靶向藥物代表之一，在非小細(xì)胞肺癌,、淋巴癌,、其他各種實(shí)體瘤的治療中作用顯著，臨床上對替尼類藥物血漿分析也對個性化用藥及精準(zhǔn)治療具有重要參考意義,。

化合物信息

實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn),，對血漿基質(zhì)來說，部分初代替尼化合物如伊馬替尼,，可以通過蛋白沉淀的方法直接進(jìn)行分析,。但對于三代替尼類藥物蛋白沉淀方法的回收率較低，很可能無法滿足分析需求,，因此我們開發(fā)了基于 SPE 的前處理方法進(jìn)行分析,，具體方案如下。

前處理

預(yù)處理：

200 µL 血漿加入 200 µL 5% 甲酸水溶液,，渦旋,，待凈化；

活化：

96 孔板依次使用 200 µL 甲醇,、200 µL 水活化,；

上樣：

加載預(yù)處理后的血漿至活化后微孔板,；

淋洗：

650 µL 水溶液淋洗微孔板；

洗脫：

用 100 µL 2% 氨水甲醇溶液洗脫 2 次,，渦旋混合,；

氮干復(fù)溶：

40 ℃ 氮?dú)飧稍锖螅尤?200 µL 初始比例流動相渦旋混合,，待檢測,。

分析

色譜條件

色譜柱：Kinetex C18 (2.1×50 mm, 1.7 μm, 100 ?); P/N: 00B-4475-AN

流動相 A 相：5mM 甲酸銨 - 0.1% 甲酸水溶液

流動相 B 相：0.1% 甲酸甲醇溶液

流速：0.5 mL/min

柱溫：40 ℃

進(jìn)樣量：5 μL

梯度程序見下表：

質(zhì)譜條件

離子源類型：電噴霧離子源（ESI+）

掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測正負(fù)離子模式（MRM）

噴霧針電壓：5500 V

離子源溫度：500 ℃

加熱器（GS1）：60 psi

輔助加熱氣（GS2）：60 psi

氣簾氣（CUR）：40 psi

碰撞氣（CAD）：10 psi

結(jié)果（藥物譜圖未能有效呈現(xiàn)）

加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

產(chǎn)品