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線性PEI陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑

2025-02-04

產(chǎn)      地:
暫無
所在地區(qū):
上海上海市
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產(chǎn)品貨號:KE1098-10ml
英文名稱:Polyethylenimine Linear(PEI)

線性PEI陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑

Polyethylenimine LinearPEI)溶液是由一種陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,,分子量40000,,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞,。線性PEI 轉(zhuǎn)染試劑廣泛適。該試劑可在含血清與抗生素的*培養(yǎng)基中發(fā)揮作用,,即使在有血清存在的情況下,,它仍然能高效的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞,。實(shí)驗(yàn)操作簡單,對大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞都有較高的轉(zhuǎn)染效率(用于常見細(xì)胞系,,如HEK-293,、HEK293T,、Hep G2Hela,、CHO-K1,、COS-1COS-7,、NIH/3T3 Sf9 ),并且細(xì)胞毒性較低,。


線性PEI陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑

操作流程(以6 孔板為例)

1.細(xì)胞鋪板

提前一天將細(xì)胞種植在六孔板中,,以轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度在70%~80%為宜。

2.轉(zhuǎn)染過程

1)在轉(zhuǎn)染前2h,,移除細(xì)胞上原有的培養(yǎng)基,換為新鮮的*培養(yǎng)基,。

2)將2ug 質(zhì)粒DNA 50uL 無血清稀釋液稀釋,,充分混勻制成DNA 稀釋液。

注意:無血清稀釋液建議采用Opti-MEM ddH2O

3)向DNA 稀釋液中直接加入4uL 轉(zhuǎn)染試劑,,室溫靜置10~15min。轉(zhuǎn)染復(fù)合物配制完成,。

4)將轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,,輕柔混勻,。

5)繼續(xù)培養(yǎng)24~48h,收取細(xì)胞進(jìn)行鑒定或加入相應(yīng)抗生素篩選穩(wěn)定克隆,。

6)使用本產(chǎn)品轉(zhuǎn)染后一般在24h 開始進(jìn)入表達(dá)高峰期,,36~48h 達(dá)到表達(dá)高峰,相對于脂

質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劉,,達(dá)到峰值的時(shí)間延后約6~12h

不同細(xì)胞培養(yǎng)容器轉(zhuǎn)染用量:

線性PEI陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑

線性PEI 轉(zhuǎn)染試劑注意事項(xiàng)

1)本產(chǎn)品對細(xì)胞非常溫和,,一般情況下轉(zhuǎn)染后無需進(jìn)行換液操作,。

2)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。                                                              

                                                                                                                                                                                                                         




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