產(chǎn)品貨號:KE1098-10ml
英文名稱:Polyethylenimine Linear(PEI)
線性PEI陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑
Polyethylenimine Linear(PEI)溶液是由一種陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,,分子量40000,,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞,。線性PEI 轉(zhuǎn)染試劑廣泛適。該試劑可在含血清與抗生素的*培養(yǎng)基中發(fā)揮作用,,即使在有血清存在的情況下,,它仍然能高效的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞,。實(shí)驗(yàn)操作簡單,對大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞都有較高的轉(zhuǎn)染效率(用于常見細(xì)胞系,,如HEK-293,、HEK293T,、Hep G2、Hela,、CHO-K1,、COS-1、COS-7,、NIH/3T3 和Sf9 等),并且細(xì)胞毒性較低,。
線性PEI陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑
操作流程(以6 孔板為例)
1.細(xì)胞鋪板
提前一天將細(xì)胞種植在六孔板中,,以轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度在70%~80%為宜。
2.轉(zhuǎn)染過程
(1)在轉(zhuǎn)染前2h,,移除細(xì)胞上原有的培養(yǎng)基,換為新鮮的*培養(yǎng)基,。
(2)將2ug 質(zhì)粒DNA 用50uL 無血清稀釋液稀釋,,充分混勻制成DNA 稀釋液。
注意:無血清稀釋液建議采用Opti-MEM 或ddH2O
(3)向DNA 稀釋液中直接加入4uL 轉(zhuǎn)染試劑,,室溫靜置10~15min。轉(zhuǎn)染復(fù)合物配制完成,。
(4)將轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,,輕柔混勻,。
(5)繼續(xù)培養(yǎng)24~48h,收取細(xì)胞進(jìn)行鑒定或加入相應(yīng)抗生素篩選穩(wěn)定克隆,。
(6)使用本產(chǎn)品轉(zhuǎn)染后一般在24h 開始進(jìn)入表達(dá)高峰期,,36~48h 達(dá)到表達(dá)高峰,相對于脂
質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劉,,達(dá)到峰值的時(shí)間延后約6~12h。
不同細(xì)胞培養(yǎng)容器轉(zhuǎn)染用量:
線性PEI 轉(zhuǎn)染試劑注意事項(xiàng)
1)本產(chǎn)品對細(xì)胞非常溫和,,一般情況下轉(zhuǎn)染后無需進(jìn)行換液操作,。
2)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。