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《數(shù)字PCR儀校準(zhǔn)規(guī)范》（征求意見(jiàn)稿）發(fā)布
2020年09月09日 09:23:52 來(lái)源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：6713

近日,，由全國(guó)生物計(jì)量技術(shù)委員會(huì)對(duì)口負(fù)責(zé)的《數(shù)字PCR儀校準(zhǔn)規(guī)范》征求意見(jiàn)稿已經(jīng)起草完成，并面向全社會(huì)公開(kāi)征求意見(jiàn),。該項(xiàng)新的校準(zhǔn)規(guī)范的主要內(nèi)容包括范圍,、引用文件、術(shù)語(yǔ)和計(jì)量單位,、概述,、計(jì)量特性、校準(zhǔn)條件,、校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法,、校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)和復(fù)校時(shí)間間隔等，適用于微滴式,、芯片式和微孔式數(shù)字聚合酶鏈反應(yīng)分析儀計(jì)量性能的校準(zhǔn),，對(duì)于其它類(lèi)型的數(shù)字PCR儀，也可參照本規(guī)范執(zhí)行,。

　　【化工儀器網(wǎng) 政策標(biāo)準(zhǔn)】數(shù)字PCR是一種核酸分子定量技術(shù),，主要采用當(dāng)前分析化學(xué)熱門(mén)研究領(lǐng)域的微流控或微滴化方法，將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,，每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè),。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后，有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),，沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào),。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度,。
 
　　近些年來(lái),，隨著數(shù)字PCR技術(shù)地不斷發(fā)展，Bio-Rad、LIFE Technologies及RainDance等廠家相繼推出技術(shù)較為成熟的數(shù)字PCR產(chǎn)品,。如今,，分子生物學(xué)技術(shù)也在迅猛發(fā)展，各實(shí)驗(yàn)室數(shù)字PCR儀數(shù)量迅速增加,，這些儀器除了被用于基礎(chǔ)科研外,，還被廣泛地用于第三方醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、出入境和疾控中心的樣品檢測(cè),。
 
　　根據(jù)《ISO/IEC 17025:2005 檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》,，檢測(cè)校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)中使用的分析設(shè)備都應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)檢定或校準(zhǔn)，以保證儀器的準(zhǔn)確性和測(cè)定結(jié)果的可溯源,，從而保證各個(gè)檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室在不同時(shí)間,、不同地點(diǎn)測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確、可比,。數(shù)字 PCR儀由于沒(méi)有檢定規(guī)程或者校準(zhǔn)規(guī)范,，無(wú)法對(duì)儀器進(jìn)行檢定校準(zhǔn)，已經(jīng)成為當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可工作中的瓶頸之一,。
 
　　有鑒于此，近日,，由全國(guó)生物計(jì)量技術(shù)委員會(huì)對(duì)口負(fù)責(zé)的《數(shù)字PCR儀校準(zhǔn)規(guī)范》征求意見(jiàn)稿已經(jīng)起草完成,，并面向全社會(huì)公開(kāi)征求意見(jiàn)。該項(xiàng)新的校準(zhǔn)規(guī)范的主要內(nèi)容包括范圍,、引用文件,、術(shù)語(yǔ)和計(jì)量單位、概述,、計(jì)量特性,、校準(zhǔn)條件、校準(zhǔn)項(xiàng)目和校準(zhǔn)方法,、校準(zhǔn)結(jié)果表達(dá)和復(fù)校時(shí)間間隔等,，適用于微滴式、芯片式和微孔式數(shù)字聚合酶鏈反應(yīng)分析儀計(jì)量性能的校準(zhǔn),，對(duì)于其它類(lèi)型的數(shù)字PCR儀,，也可參照本規(guī)范執(zhí)行。
 
　　數(shù)字PCR儀的計(jì)量特性有溫度示值誤差,、溫度均勻度,、升降溫速率、拷貝數(shù)濃度重復(fù)性,、熒光強(qiáng)度重復(fù)性等,，具體內(nèi)容如下表1所示：
 
　　儀器校準(zhǔn)的環(huán)境條件為：實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)滿(mǎn)足儀器安裝的要求，不得存在強(qiáng)烈的機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾，校準(zhǔn)時(shí)實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)當(dāng)控制在(15~30)℃,，相對(duì)濕度不大于 70%,。另外，校準(zhǔn)時(shí)的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)及其他設(shè)備有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),、溫度校準(zhǔn)裝置,、電子天平、移液器以及配制校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)所需純水,。需要注意的是,，校準(zhǔn)前需將數(shù)字PCR儀開(kāi)機(jī)預(yù)熱30min，確保儀器達(dá)到正常工作狀態(tài),。
 
　　以上校準(zhǔn)規(guī)范為首次發(fā)布,，在制定過(guò)程中主要參考了JJF1527-2015 《聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》。
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