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1.1 實(shí)驗(yàn)材料
胡蘿卜上胚軸經(jīng)黑暗培養(yǎng)形成的愈傷組織（可與體細(xì)胞胚誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)同時培養(yǎng)）,。
1. 2 培養(yǎng)基
MS無機(jī)鹽附加：煙酸0.05mg/L、VB6和VB1各0.01mg/L,、甘氨酸3mg/L,、肌醇100mg/L、激動素0.2mg/L,、2,4-D 0.1mg/L,、蔗糖20g/L，pH5.8,。
1.3 實(shí)驗(yàn)操作
a. 按照培養(yǎng)基配方配制液體培養(yǎng)基,，分裝于200ml三角瓶中，每瓶30-50ml培養(yǎng)基,，滅菌待用,；
b. 在凈化工作臺上，將復(fù)合要求的松散愈傷組織用細(xì)胞鏟接種于含有培養(yǎng)基地三角瓶中,。接種量大約為培養(yǎng)基體積的十分之一,；
小鼠細(xì)胞 傳代細(xì)胞 六月熱銷中c. 接種后的三角瓶置于搖床上，在轉(zhuǎn)速100rpm,，25℃下光照培養(yǎng),；
d. 每隔4周將懸浮培養(yǎng)物繼代1次,，方法是把5ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到50ml新鮮培養(yǎng)基中（1:10），如果有大的細(xì)胞塊,，則在繼代時先用一細(xì)胞篩過濾除去過大的細(xì)胞塊,，在進(jìn)行接種。
2. 種細(xì)胞的篩選
種細(xì)胞的篩選是為細(xì)胞次生產(chǎn)物生產(chǎn)提供高產(chǎn)細(xì)胞系的中間環(huán)節(jié),，為了獲得一致的細(xì)胞產(chǎn)量和產(chǎn)物產(chǎn)量,，根據(jù)不同的植物和產(chǎn)物類型，有不同的篩選方法,。其基本操作是單細(xì)胞平板培養(yǎng)。
a. 將細(xì)胞懸浮系在上述培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,，每隔7天繼代一次,，每次按細(xì)胞懸液與新鮮培養(yǎng)基1:5的比例接種；
b. 將新鮮配制的瓊脂培養(yǎng)基在未凝固前,，與處于對數(shù)生長期的細(xì)胞懸浮液按4:1混合后，平鋪在培養(yǎng)皿中,，操作時特別注意溫度不能過高，以免給細(xì)胞造成傷害,。如果懸浮系中的有過大的細(xì)胞團(tuán),，需過濾除去大的細(xì)胞團(tuán)。
小鼠細(xì)胞 傳代細(xì)胞 六月熱銷中c. 在細(xì)胞分裂形成可見的小愈傷組織時,，將單個細(xì)胞的愈傷組織分別接種在平板培養(yǎng)基上單獨(dú)培養(yǎng),，由每個細(xì)胞形成的愈傷組織即為一個細(xì)胞系（clone）,。
d. 待愈傷組織長至能檢測成分的大小時，取每個愈傷組織的一半用于成分分析,，另一半繼續(xù)培養(yǎng),。成分分析完成后，淘汰不符合要求的愈傷組織,，對復(fù)合要求的愈傷組織擴(kuò)大繁殖,。
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