資料簡介
人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒用 途:
人LDH ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織,、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的LDH ,。本試劑盒可以檢測天然和重組的LDH ,。本試劑盒于科研,、而非用于臨床診斷,。
試驗原理:
人LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知LDH 濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將LDH 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,、B,,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關(guān)系,。
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul,、10 ul,、50 ul、100 ul,、200,、500 u、1000lul,。
振蕩器及磁力攪拌器等,。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存,。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒樣品收集,、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存,。稀釋前將標準品振蕩混勻,。
洗滌緩沖液(20×)的稀釋:蒸餾水20倍稀釋。
操作步驟
使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。
結(jié)果分析
以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的LDH 標準品濃度為橫坐標(X),,做得相應(yīng)的曲線,,樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果,。
試劑盒性能
靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990,。
特異性:不與人其它細胞因子反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%,。
人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒DA2355-0.1ml MCP-1/CCL2 (monocyte chemotactic protein1)mouse, rat 單核細胞趨化蛋白1抗體(大、小鼠) 0.1ml
DA2355-0.2ml MCP-1/CCL2 (monocyte chemotactic protein1)mouse, rat 單核細胞趨化蛋白1抗體(大,、小鼠) 0.2ml
DA2356-0.2ml MCP-1/CCL2(Monocyte chemotactic protein 1)human 單核細胞趨化蛋白1抗體(人) 0.2ml
DA2357-0.2ml MCP-2/CCL8(Monocyte chemotactic protein 2)human 單核細胞趨化蛋白2抗體(人) 0.2ml
DA2358-0.2ml MCP-2/CCL8(Monocyte chemotactic protein 2)rat,mouse 單核細胞趨化蛋白2抗體(大,、小鼠) 0.2ml
DA2359-0.2ml MCP-3/CCL7(Monocyte chemotactic protein 3)human 單核細胞趨化蛋白3抗體(人) 0.2ml
DA2360-0.2ml MCP-3/CCL7(Monocyte chemotactic protein 3)(rat,mouse) 單核細胞趨化蛋白3抗體(大、小鼠) 0.2ml
DA2361-0.2ml CCL9/CCL10/MIP-1 gamma(Macrophage inflammatory protein 1-γ) 巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體 0.2ml
DA2362-0.2ml MC-1R (melanocortin-1-receptor) 黑皮質(zhì)素-1受體抗體 0.2ml
DA2363-0.2ml MCT1(monocarboxylate transporter 1) 單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白-1抗體 0.2ml
DAR1158-0.1ml Rabbit anti-mouse IgM/APC 熒光素APC標記兔抗小鼠IgM 0.1ml
DAR1159-0.1ml Rabbit anti-horse IgG/APC 熒光素APC標記兔抗馬IgG 0.1ml
DA2364-0.2ml MCM2(minichromosome maintenance protein 2) 微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.2ml
DA2365-0.2ml MCM3(minichromosome maintenance deficient 3) 微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.2ml
DA2366-0.2ml MCM7(minichromosome maintenance protein 7) 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體 0.2ml
DA2367-0.1ml M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors) 巨噬細胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
DA2367-0.2ml M-CSF (Macrophage Colony Stimulating Factors) 巨噬細胞克隆刺激因子抗體 0.2ml
DA2368-0.2ml Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) 髓樣細胞白血病-1抗體 0.2ml
DA2369-0.1ml MDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗體 0.1ml
DA2369-0.2ml MDM2 (urine double minute 2) 雙微體2癌基因抗體 0.2ml
DAR1161-0.1ml Streptavidin/APC 熒光素APC標記鏈霉親和素 0.1ml
DAR1162-0.1ml rec Protein A/APC 熒光素APC標記重組純化蛋白A 0.1ml
DA2370-0.1ml MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗體 0.1ml
DA2370-0.2ml MDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗體 0.2ml
DA2371-0.2ml MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2) 肌細胞增強因子2抗體 0.2ml
DA2374-0.2ml Melamine 三聚氰胺抗體 0.2ml
DA2375-0.2ml Melan-A/MART-1 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 0.2ml
DA2377-0.2ml MEK1/MAPKK1/MEKK1(mitogen activated protein kinase kinase 1) MEK1/MAPKK1抗體(N-端) 0.2ml
DA2378-0.2ml Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體 0.2ml
人乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒DA2379-0.2ml Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體 0.2ml
DA2380-0.2ml Mfn1 (Mitofusin1) 線粒體融合蛋白1抗體 0.2ml
DAR1164-0.1ml Mouse IgG/APC 熒光素APC標記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
DAR1165-0.1ml Goat IgG/APC 熒光素APC標記羊IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
DAR1166-0.1ml Rat IgG/APC 熒光素APC標記大鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
DAR1167-0.1ml Bovine IgG/APC 熒光素APC標記牛IgG 0.1ml
DAR1168-0.1ml Bovine IgM/APC 熒光素APC標記牛IgM 0.1ml
DA2381-0.1ml MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml
DA2381-0.2ml MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
DA2382-0.2ml MT(metallothionein) 金屬硫蛋白抗體 0.2ml
DA2383-0.2ml MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(NT) 層粘連蛋白受體1抗體(N端) 0.2ml
DA2384-0.2ml MTA1(Metastasis-associated 1) 腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
DA2385-0.2ml MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗體(C端) 0.2ml
DA2386-0.2ml Myf6(Myogenic factor 6) 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 0.2ml
DAR1175-0.1ml Guinea IgM/APC 熒光素APC標記豚鼠IgM 0.1ml
DAR1176-0.1ml Horse IgG/APC 熒光素APC標記馬IgG 0.1ml
DAR1177-0.1ml Horse IgM/APC 熒光素APC標記馬IgM 0.1ml
DAR1178-0.1ml human IgG/APC 熒光素APC標記人IgG 0.1ml
DAR1179-0.1ml human IgM/APC 熒光素APC標記人IgM 0.1ml
DA2387-0.2ml MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 細胞應(yīng)激分子抗體 0.2ml
DA2388-0.2ml Microsporidia 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體 0.2ml
DA2389-0.2ml Midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1抗體 0.2ml
DA2390-0.2ml Midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2抗體 0.2ml
DA2391-0.2ml MK(Midkine) 中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體 0.2ml
DA2392-0.2ml MLCK(myosin light chain kinase) 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 0.2ml
DA2393-0.1ml MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細胞移動抑制因子抗體 0.1ml
DA2393-0.2ml MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) 巨噬細胞移動抑制因子抗體 0.2ml
DA2394-0.1ml MIP-1α (macrophage inflammatory protein 1α) 巨噬細胞炎癥因子1α抗體 0.1ml
DA2394-0.2ml MIP-1α (macrophage inflammatory protein 1α) 巨噬細胞炎癥因子1α抗體 0.2ml
DA2421-0.2ml Mouse IgA 抗小鼠IgA抗體 0.2ml
DA2431-0.2ml α-MSH/POMC(alpha-melanocyte stimulating hormone) α黑素細胞刺激素/阿黑皮素原抗體 0.2ml
DA2395-0.1ml MIP-1β (macrophage inflammatory protein 1β) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗體 0.1ml
DA2395-0.2ml MIP-1β (macrophage inflammatory protein 1β) 巨噬細胞炎癥因子1β 抗體 0.2ml
DA2396-0.1ml MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬細胞炎癥蛋白2抗體 0.1ml
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