培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法,。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,，將細(xì)胞瓶放入37℃,、5%CO₂的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理,。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張）,，前三天照片是重要售后依據(jù),，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好,。

SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞HFOB1.19細(xì)胞培養(yǎng)步驟

a、細(xì)胞傳代：如果未超過(guò)80%匯合度時(shí),，將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中,，留5ml培養(yǎng)基，放入37℃,、5%CO₂孵箱培養(yǎng),；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞HFOB1.19貼壁細(xì)胞傳代步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上培養(yǎng)基終止消化,。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，使之脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基重懸。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25瓶）,，補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入到37℃、5%CO₂的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。