CY5.5-卵清蛋白（Cy5.5 labeled ovalbumin）是一種重要的熒光標記物,，由近紅外熒光染料CY5.5與卵清蛋白（ovalbumin,，OVA）通過化學方法共價連接而成。以下是關(guān)于CY5.5-卵清蛋白的詳細介紹：

一,、組成成分

CY5.5-卵清蛋白由兩部分組成：

1. 近紅外熒光染料CY5.5：

• 性質(zhì)：具有優(yōu)異的光學特性,，其激發(fā)波長約為675nm，發(fā)射波長約為695~710nm,，處于近紅外區(qū)域,。

• 作用：作為熒光標記物，使CY5.5-卵清蛋白在生物成像中具有更深的組織穿透能力和更低的背景自發(fā)熒光干擾,。

2. 載體蛋白卵清蛋白：

• 性質(zhì)：一種常用的生物大分子載體,，具有多個反應(yīng)性位點，如賴氨酸殘基上的氨基,，可以與CY5.5的活性基團（如NHS酯）進行共價連接,。

• 來源：通常從雞蛋清中提取，分子量約為43kDa,。

• 作用：作為CY5.5的載體,，提高其在體內(nèi)的穩(wěn)定性和生物相容性。

二,、合成方法

CY5.5標記卵清蛋白的過程通常包括以下幾個步驟：

1. 將CY5.5-NHS酯溶解在少量無水有機溶劑（如DMSO或DMF）中,，確保其在水溶液中不會快速水解。

2. 在緩沖溶液中（如pH 8.0左右的PBS緩沖液）加入適量的卵清蛋白溶液,。

3. 緩慢加入CY5.5-NHS酯溶液到卵清蛋白溶液中,，同時輕輕攪拌，以促進酯與蛋白質(zhì)氨基的偶聯(lián)反應(yīng),。通常在室溫或冰浴條件下反應(yīng)1~2小時,。

4. 調(diào)整pH值以保持在8.0附近，有助于提高酰胺鍵的形成效率。

5. 使用凝膠過濾或透析的方法去除未反應(yīng)的CY5.5-NHS酯和其他小分子,。

6. 純化后得到的CY5.5標記卵清蛋白可以通過吸光度和熒光光譜測定標記效率,。

三、特性與應(yīng)用

1. 熒光特性：由于CY5.5染料的激發(fā)和發(fā)射波長處于近紅外區(qū)域,，使得CY5.5-卵清蛋白在生物成像中具有更深的組織穿透能力和更低的背景自發(fā)熒光干擾,，從而提高成像的清晰度和準確性。

2. 光穩(wěn)定性：CY5.5染料在生理條件下穩(wěn)定,，不易受到光漂白的影響,，能夠保持長時間的熒光信號。這使得CY5.5-卵清蛋白在長時間的成像實驗中仍能保持穩(wěn)定的熒光強度,，適用于活體成像和實時檢測,。

3. 生物兼容性：CY5.5是水溶性染料，易于與蛋白質(zhì)結(jié)合,，且通常不會顯著影響蛋白質(zhì)的功能或結(jié)構(gòu),。卵清蛋白也具有良好的生物相容性，因此CY5.5-卵清蛋白在生物體內(nèi)應(yīng)用中具有較高的安全性,。

4. 應(yīng)用：

• 生物成像：可用于熒光顯微鏡觀察,、流式細胞分析、蛋白質(zhì)印跡等應(yīng)用中,。通過與特定的抗體結(jié)合,，可以用于檢測組織或細胞中的抗原，實現(xiàn)熒光成像和定量分析,。

• 藥物研發(fā)：CY5.5-卵清蛋白的近紅外熒光發(fā)射特性使其能夠穿透生物組織,，因此特別適合用于體內(nèi)成像和藥物分布、代謝等方面的研究,。通過監(jiān)測CY5.5-卵清蛋白在體內(nèi)的分布和代謝情況,，可以為藥物研發(fā)提供重要的信息。

• 免疫研究：卵清蛋白作為常用的載體蛋白,，具有良好的免疫原性,。CY5.5-卵清蛋白可用于免疫學研究，如作為免疫原制備抗體,、研究免疫反應(yīng)等,。

四、注意事項

1. CY5.5-卵清蛋白通常僅用于科學研究實驗,，不適合人類或獸醫(yī)使用,。

2. 在使用過程中應(yīng)嚴格遵循實驗室操作規(guī)范，確保人身安全和實驗效果,。

3. 儲存時應(yīng)在適當?shù)牡蜏貤l件下保存,，以保持其穩(wěn)定性和活性,。

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