資料簡介
本公司為國內試劑盒供應商之一,,質量保證,。
公司主頁:www.shjlsw.com,、
本試劑僅供研究使用
人載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒使用說明書
試劑盒組成:48孔配置/96孔配置
說明書:1份
封板膜:2片(48)/2片(96)
密封袋:1個
目的:【人載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒說明書】本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中載脂蛋白B100(apo-B100)的含量,。
服務承諾:
供貨期:款到發(fā)貨,。
工作時間內免費的技術咨詢和指導 。請
為客戶提供來樣檢測服務,,zui大限度實驗結果的有效性(免費代測),。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2
2.有效期:6個月
檢測范圍:
0.2IU/L - 6IU/L
試劑盒組成:
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2 |
標準品:2700ng/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2 |
實驗原理:
【人載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒說明書】本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人載脂蛋白B100(apo-B100)水平,。用純化的人載脂蛋白B100(apo-B100)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入載脂蛋白B100(apo-B100),,再與HRP標記的載脂蛋白B100(apo-B100)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的載脂蛋白B100(apo-B100)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品中人載脂蛋白B100(apo-B100)濃度。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應再次離心,。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2
6. 標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*,、第二孔中分別加標準品100μl,,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,,混勻,;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,,再在第三,、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻,;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,,再在第五,、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻,;混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,,再在第七,、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,,600ng/L,,300ng/L, 150ng/L),。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、待測樣品孔,。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色),。
11. 測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度,。
【人載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒說明書】注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存,。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。
3. 各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內,,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準。
相關產(chǎn)品
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