無(wú)外泌體血清 梅約診所如何開(kāi)展exosome研究
exosome如今是個(gè)熱門(mén)的話題,。這種直徑約為30-150 nm的小囊泡天然存在于所有體液中,包括血液,、唾液,、尿液和母乳,且其蛋白,、RNA和脂肪成分特異,,因此,exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用,。如何開(kāi)展exosome的研究,?我想這是大家都感興趣的。那就讓我們來(lái)看看的梅約診所(Mayo Clinic)是怎樣做的,。
exosome如今是個(gè)熱門(mén)的話題,。這種直徑約為30-150 nm的小囊泡天然存在于所有體液中,包括血液,、唾液,、尿液和母乳,且其蛋白,、RNA和脂肪成分特異,,因此,exosome有望在多種疾病的早期診斷中發(fā)揮作用,。如何開(kāi)展exosome的研究,?我想這是大家都感興趣的。那就讓我們來(lái)看看的梅約診所(Mayo Clinic)是怎樣做的,。
梅約診所的Gregory Gores博士主要開(kāi)展肝臟疾病的基礎(chǔ)研究,。他所感興趣的領(lǐng)域之一是脂毒性及其在非酒精性脂肪性肝病發(fā)展中的作用。研究小組提出假說(shuō),認(rèn)為脂毒性誘導(dǎo)肝臟細(xì)胞釋放囊泡(exosome和小囊泡),。他們推測(cè),,這些細(xì)胞外囊泡參與了免疫細(xì)胞的招募和激活,導(dǎo)致肝臟炎癥,。
Gores博士的小組需要測(cè)定樣品中細(xì)胞外囊泡的大小分布和數(shù)量,。之前,他們使用掃描電鏡來(lái)觀察和測(cè)定顆粒大小,,并通過(guò)吸光度來(lái)測(cè)定蛋白含量,,但發(fā)現(xiàn)這種方法不大準(zhǔn)確。于是,,他們選擇了NanoSight的納米顆粒追蹤分析(NTA)技術(shù),。有了這一技術(shù),他們能夠在分離后立即分析囊泡,,并在同一天內(nèi)將濃度的囊泡用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,他們使用的是NS300納米顆粒分析儀,。此款儀器能夠測(cè)定大小在10-2000 nm的懸浮顆粒,,滿(mǎn)足廣泛的應(yīng)用需求,包括蛋白聚集,、exosome和囊泡研究,、藥物運(yùn)輸,也特別適合以熒光量子點(diǎn)標(biāo)記的顆粒分析,。
這個(gè)款的NanoSight儀器提供了多方面的分析,。它配備一個(gè)能同時(shí)放置六塊熒光濾片的機(jī)動(dòng)濾光輪,并具有流變特征,,可測(cè)定在0-5 cP范圍內(nèi)的粘度,。它還配有高靈敏度的CMOS攝像頭、溫度控制,,以及激光塊的選擇,。它外形小巧,占地僅為40 cm長(zhǎng)和25 cm寬,,適合那些空間有限的實(shí)驗(yàn)室,。
在談及NS300納米顆粒分析儀時(shí),研究員Petra Hirsova博士談道:“能夠?qū)崟r(shí)地看到,、計(jì)數(shù)并測(cè)定顆粒的大小,,這相對(duì)于我們使用過(guò)的其他技術(shù)已經(jīng)是很大的優(yōu)勢(shì)。與掃描電鏡相比,,NTA制備樣品和獲得結(jié)果要更輕松,、更快速,。與測(cè)定囊泡總蛋白的技術(shù)相比,,NTA帶來(lái)了細(xì)胞外囊泡的更評(píng)估,。”
NanoSight是一家私營(yíng)公司,總部設(shè)在英國(guó),。它已在范圍內(nèi)出售了500多臺(tái)儀器,,其客戶(hù)包括葛蘭素史克、諾華,、輝瑞,、寶潔、聯(lián)合利華等,,以及zui的大學(xué)和研究所,。截至目前,NanoSight的技術(shù)已被900多篇第三方文獻(xiàn)引用,。在今年9月,,NanoSight被思百吉集團(tuán)所收購(gòu)。
上?;鄯f生物供應(yīng)高品質(zhì)無(wú)外泌體血清Exosome-free FBS,,適用外泌體研究,-20℃,,特點(diǎn):無(wú)支原體,,無(wú)內(nèi)毒素。
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