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SP試劑盒即大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒
檢測(cè)程序：
在使用前,，將所有試劑和樣品室溫,。再次離心樣品解凍后測(cè)定前,。據(jù)建議,，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來(lái)測(cè)定一式兩份,。
1,。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中,。
2,。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑,，密封保鮮袋,，將未使用的井在4°C的含量布局表
,。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供,。孵育2小時(shí),，在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
4,。每孔中取出的液體,，不洗。
5,。向每孔中加入100μl生物素抗體（1倍）,。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。為1小時(shí)孵育在37℃下（生物素抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁,。預(yù)熱至室溫,，輕輕混勻，直到出現(xiàn)均勻解決方案,。）
6。吸液的各孔和洗滌,，共洗滌三次重復(fù)該過程兩次,。洗凈，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶,，多道移液器,，歧管器，或autowasher,，和,，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能,。zui后一次洗滌后,，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾,。
7,。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）。量的微量滴定板,，用一個(gè)新的粘接劑條,。溫育1小時(shí)，在37℃下
8,。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,，在步驟6的5倍。
9,。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中,。孵育15-30分鐘，在37℃下避光
10。一站式解決方案,，每孔加入底物,，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合,。
11,。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm,，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度,。如果波長(zhǎng)校正，設(shè)置為540nm或570nm處,。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù),。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,，可能會(huì)比較高,，不太準(zhǔn)確。
檢測(cè)程序：
在使用前,，將所有試劑和樣品室溫,。再次離心樣品解凍后測(cè)定前,。據(jù)建議,，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來(lái)測(cè)定一式兩份,。
1,。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中,。
2,。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑,，密封保鮮袋,，將未使用的井在4°C的含量布局表
,。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供,。孵育2小時(shí),，在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
4,。每孔中取出的液體,，不洗。
5,。向每孔中加入100μl生物素抗體（1倍）,。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。為1小時(shí)孵育在37℃下（生物素抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁,。預(yù)熱至室溫,，輕輕混勻，直到出現(xiàn)均勻解決方案,。）
6。吸液的各孔和洗滌,，共洗滌三次重復(fù)該過程兩次,。洗凈，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶,，多道移液器,，歧管器，或autowasher,，和,，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能,。zui后一次洗滌后,，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾,。
7,。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）。量的微量滴定板,，用一個(gè)新的粘接劑條,。溫育1小時(shí)，在37℃下
8,。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,，在步驟6的5倍。
9,。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中,。孵育15-30分鐘，在37℃下避光
10。一站式解決方案,，每孔加入底物,，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合,。
11,。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm,，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度,。如果波長(zhǎng)校正，設(shè)置為540nm或570nm處,。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù),。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,，可能會(huì)比較高,，不太準(zhǔn)確。
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