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HPLC柱前衍生和柱后衍生

來源:深圳市諾亞迪化學(xué)科技有限公司   2016年06月13日 14:20  

1,、為什么要衍生,?
衍生化zui為主要的目的就是提高目的物的可檢測性。對于GC來講,,多數(shù)是為了增強(qiáng)目的物揮發(fā)性或者改善目的物極性,;對于HPLC來講多數(shù)是為了提高檢測器對目的物的相應(yīng)。
2,、衍生化分類:柱前衍生和柱后衍生,。柱前衍生是在經(jīng)過分析柱前使分析物與衍生劑反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物在分析柱上實現(xiàn)分離,,實際分離的是衍生產(chǎn)物,,檢測的也是衍生產(chǎn)物,;柱后衍生是分離物在分析柱中實現(xiàn)分離后,在衍生池內(nèi)與衍生劑反應(yīng),,在柱子中分離的是目的物,,在檢測器處檢測的衍生產(chǎn)物。
3,、適用的化合物:生物酸/堿,、胺類、抗生素(聚醚類抗生素多見)和氨基酸類,。
4,、衍生化要求?
1)衍生劑必須過量且穩(wěn)定,;不過量反應(yīng)不*,,檢測不充分。不穩(wěn)定,,重現(xiàn)性差,。
2)衍生物、衍生產(chǎn)物和衍生副產(chǎn)物至少是好分離的,。當(dāng)然如果只能檢測到衍生產(chǎn)物,。
3)衍生反快速*。反應(yīng)慢,,柱前衍生還可以,,但柱后不行。因為流速固定,,衍生池管路長度一定,,留給衍生化的時間是一定的。柱前衍生可以在系統(tǒng)外等衍生完畢后進(jìn)樣,,但也是影響效率的,。
5、兩種衍生比較
柱前衍生優(yōu)點是,,對設(shè)備要求不高,,可以手工衍生,而且對衍生時間要求相對寬泛,。缺點是,,引入了過多的物質(zhì),如:衍生劑,、衍生產(chǎn)物(當(dāng)然這個是檢測需要的)和衍生副產(chǎn)物,對柱子有潛在的負(fù)面影響,,另如采用手工衍生也會引入過多的認(rèn)為因素,。
柱后衍生優(yōu)點是,,重現(xiàn)性好,認(rèn)為因素少,,引入物質(zhì)比較少,。缺點是,可能有擴(kuò)散問題,,在柱子中分離結(jié)束后,,就存在擴(kuò)散,如果衍生慢(必然流速低),、管路長擴(kuò)散問題就會比較嚴(yán)重,,再有就是要求有一套外源的泵系統(tǒng)和一個檢測池,對于設(shè)備要求較高,。

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