PCR新手指南：PCR現(xiàn)在又?jǐn)U增不出來(lái)了怎么辦？

來(lái)源：上海金鵬分析儀器有限公司 2016年06月01日 14:14

這個(gè)問(wèn)題是常見的問(wèn)題,，就是一個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)一直都做得很好,，停一段時(shí)間后再做就不行了,。一通亂找原因后還是不行，很痛苦,！

找問(wèn)題要從大到?。?/p>

1、PCR擴(kuò)增體系問(wèn)題
用其他正在進(jìn)行的且擴(kuò)增正常的模板和引物證明PCR擴(kuò)增體系沒有問(wèn)題,，即PCR反應(yīng)混合物,、水、取液器,、PCR儀,、操作等都是好的（陽(yáng)性對(duì)照）

2,、引物問(wèn)題
用以前擴(kuò)增產(chǎn)物做模板（稀釋50倍），證明引物沒有問(wèn)題

3,、只是模板問(wèn)題了,。
因?yàn)闃颖窘到獾目赡苄员纫锝到獾目赡苄愿叩枚唷Ｒ部赡苁菢颖局械囊种莆镞^(guò)多（新鮮時(shí)沒有溶出來(lái)）,。

不要靠運(yùn)氣找問(wèn)題,，先做*條很重要。亂找問(wèn)題常常讓人失去信心的,。

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