熒光淬滅又稱熒光熄滅或萃滅,,是指導致特定物質的熒光強度和壽命減少的所有現象,。
引起熒光熄滅的物質稱為熒光熄滅劑。
如,,鹵素離子,、重金屬離子、氧分子以及硝基化合物,、重氮化合物,、羧基和羰基化合物均為常見的熒光熄滅劑
原因很多,機理也很復雜,,主要包括:
①因熒光物質的分子和熄滅劑分子碰撞而損失能量,;
②熒光物質的分子與熄滅劑分子作用生成了本身不發(fā)光的的配位化合物;
③溶解氧的存在,,使得熒光物質氧化,,或是由于氧分子的順磁性,促進了體系間跨越,使得激發(fā)單重態(tài)的熒光分子轉變至三重態(tài),;
④當熒光物質濃度過大時,會產生自淬滅現象
一個特意為免疫熒光反應設計的封片劑,,*的配方使得染料的熒光不再衰退。常用的抗熒光衰退劑有AF1,、AF2,、AF3、AF87,其中AF87是一個*的油性抗熒光衰退劑,。
產品選購指南:
AF1:用于檢測經常浸泡在甘油中間組織切片,,它的基本成分是甘油、磷酸鹽緩沖液,、其它成分
AF2的基本成分是甘油和其它成分
AF3的基本成分是磷酸鹽緩沖液和其它成分,,對于活細胞檢測特別適用
AF87特別的地方是含有無熒光浸油,這是為在高倍鏡下觀察特別設計的封片劑,,對于DAPI染色特別有用(DAPI 在甘油基封片劑中有疏散的傾向)。
CFPVOH是聚乙烯醇的水溶液
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17970-25 | CitiFluor™ AF1 | 25 ml |
17971-25 | CitiFluor™ AF2 | 25 ml |
17972-25 | CitiFluor™ AF3 | 25 ml |
17976-10 | CitiFluor™ AF87 | 10 ml |
17978-35 | Set of CitiFluor™ CFPVOH and AF100* | 25 ml+ 5 ml |
Fluoro-Gel是一種水基封片劑,,主要用作組織切片免疫熒光染色后*性封片,。由于有些含有甲苯或者二甲苯的封片劑在熒光染色步驟不適合應用,此產品的*配方就發(fā)揮了作用,,阻止了染色后的一些熒光信號快速變弱的現象,。推薦以下熒光染料染色后用本產品封片,FITC, Texas Red, AMCA, Cy2, Cy3, Cy5, Alexa Fluoro 488, Alexa Fluoro 594, Green Fluorescent Protein (GFP), Tetramethylyrhodamine, Redox, Phycoerythrin (RP-E), Phyocyanin (PC), and Allophycocyanin (APC),。熒光封片劑封片后建議在暗處4ºC保存,。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17985-10 | Fluoro-Gel, (with Tris Buffer) | 20 ml |
17985-11 | Fluoro-Gel, (with Tris Buffer) | 100 ml |
17985-30 | Fluoro-Gel, (with TES Buffer) | 20 ml |
17985-31 | Fluoro-Gel, (with TES Buffer) | 100 ml |
17985-40 | Fluoro-Gel, (with PIPE Buffer) | 20 ml |
17985-41 | Fluoro-Gel, (with PIPE Buffer) | 100 ml |
備注:這是BioMedaTM Gel-Mount 的替代品!
2.附帶介紹與熒光封片膠Fluoro-Gel用途和用法*相同的一款封片劑:EMS-SHIELD MOUNT.
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17985-09 | EMS SHIELD MOUNT | 30ml |
17985-100 | EMS SHIELD MOUNT | 100ml |
3.二號熒光封片劑Fluoro-Gel II Mounting Medium
與Fluoro-Gel相似(Tris Buffer),,不同在于二號產品含有DAPI (4, 6-diamino-2-phenylindole),,DAPI是DNA復染的染料。此產品在原位雜交技術或者其他需要DNA熒光染色的技術中經常用到,。DAPI發(fā)藍色熒光,,RNA同時被染。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17985-50 | Fluoro-Gel II | 20 ml |
17985-51 | Fluoro-Gel II | 100 ml |
4.三號熒光封片劑Fluoro-Gel III Mounting Medium
Fluoro-Gel III與Fluoro-Gel相似(Tris Buffer),,不同在于三號產品加了PI (Propidium Iodide),,這也是DNA復染的一種染料。三號產品在以下染料FITC, Texas Red, AMCA, Cy2, Cy3, Cy5, Alexa Fluoro 488, Alexa Fluoro 594, Green Fluorescent protein (GFP), Tetramethylyrhodamine, Redox, Phycoerythrin (RP-E), Phyocyanin (PC), and Allophycocyanin (APC),。本產品不含Phynylenediamine,,Phynylenediamine極容易破壞Cy dyes, RP-E, PC, and APC的免疫熒光,PI發(fā)紅色熒光,,RNA同時也被染色,。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17985-60 | Fluoro-Gel III | 20 ml |
17985-61 | Fluoro-Gel III | 100 ml |
5.抗熒光淬滅封片劑Fluoro Gel with DABCO
熒光分子與溶劑或其他分子之間相互作用使熒光強度減弱的現象稱為熒光淬滅。這通常是因為熒光分子在激發(fā)光的照射下,,反復經歷多次激發(fā),、發(fā)射過程后,,往往造成分子內部結構發(fā)生不可逆的變化,不能吸收更多的光子而進一步發(fā)射熒光,,這時就稱該分子被光漂白了,。當激光功率高時,熒光分子有可能在高強度的激光下被漂白了,。當熒光物質濃度過大時,,也會產生自淬滅現象。
針對熒光試驗中遇到的光漂白或者熒光淬滅現象專門開發(fā)出Fluoro Gel with DABCO抗熒光淬滅封片劑,。DABCO是抵抗熒光信號淬滅的化學品(抗氧化劑),。其主要原理是可以有效避免熒光染色后的固定細胞或組織等樣品不被氧化,從而防止熒光淬滅導致的熒光信號減弱現象,,可以用于減緩各種常見熒光染料的熒光淬滅,。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17985-01 | Fluoro Gel with DABCO抗熒光淬滅封片劑 | 20ml |
17985-02 | Fluoro Gel with DABCO | 100ml |
6.附帶介紹與Fluoro-Gel with DABCO用途和用法*相同的一款封片劑:EMS-SHIELD MOUNT WITH DABCO.
附帶介紹與熒光封片膠Fluoro-Gel with DABCO用途和用法*相同的一款封片劑:EMS-SHIELD MOUNT WITH DABCO.
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
17985-150 | EMS-Shiels Mount With DABCO抗熒光淬滅封片劑 | 30ml |
17985-200 | EMS-Shiels Mount With DABCO | 100ml |
7.抗熒光衰退封片劑
是一種水基封片劑,在Fluoro Gel配方的基礎上加對苯二胺(1,4-phenylenediamine),。特別適用于阻止FITC,、Texas Red、 AMCA,、 Cy2,、 Cy3、 Cy5,、 Alexa Fluoro 388,、 Alexa Fluoro 594 tetramethyly rhodamine,、 Redox.這些熒光染料的光漂白現象,。封片后4度暗處保存,。
注意,因為含有對苯二胺,,不適用于Cy dyes,,、Phycoerythrin (R-PR)、 phycocyanin (PC),、 allophycocyanin (APC)這些染料的封片,,封片劑自身顏色黑咖啡色,不與免疫熒光有任何反應,。
貨號 | 產品描述 | 規(guī)格 |
17983-20 | Fluoro-Gel with Anti-Fading Agent | 20 ml |
17983-100 | Fluoro-Gel with Anti-Fading Agent | 100 ml |
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