一,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹　?. 掌握用外標(biāo)法進(jìn)行色譜定量分析的原理和方法?！　?. 了解氣相色譜儀氫火焰離子檢測器FID的性能和操作方法,?！　?. 了解氣相色譜法在產(chǎn)品質(zhì)量控制中的應(yīng)用?！　?. 學(xué)習(xí)氣相色譜法測定甲醇含量的分析方法,。　　二,、實(shí)驗(yàn)原理　　在釀造白酒的過程中,，不可避免地有甲醇產(chǎn)生。甲醇是無色透明的具有高度揮發(fā)性的液體,，是一種對人體有害的物質(zhì),。甲醇在人體內(nèi)氧化為甲醛、甲酸,，具有很強(qiáng)的毒性,，對神經(jīng)系統(tǒng)尤其是視神經(jīng)損害嚴(yán)重,，人食入 5 g 就會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重中毒,，超過 12. 5 g 就可能導(dǎo)致死亡，在白酒的發(fā)酵過程中,，難以將甲醇和乙醇*分離,，因此國家對白酒中甲醇含量做出嚴(yán)格規(guī)定。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)(GB10343-89),，食用酒精中甲醇含量應(yīng)低于0.1g?L-1(優(yōu)級(jí))或0.6 g?L-1(普通級(jí)),。　　氣相色譜法是一種,、快速而靈敏的分離分析技術(shù),，具有*的分離效能。一個(gè)混合物樣品定量引入合適的色譜系統(tǒng)后,，樣品被氣化后,，在流動(dòng)相攜帶下進(jìn)入色譜柱，樣品中各組分由于各自的性質(zhì)不同,，在柱內(nèi)與固定相的作用力大小不同,，導(dǎo)致在柱內(nèi)的遷移速度不同，使混合物中的各組分先后離開色譜柱得到分離,。分離后的組分進(jìn)入檢測器,，檢測器將物質(zhì)的濃度或質(zhì)量信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)輸給記錄儀或顯示器，得到色譜圖,。利用保留值可定性,，利用峰高或峰面積可定量?！　⊥鈽?biāo)法是在一定的操作條件下,，用純組分或已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制一系列不同含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,，準(zhǔn)確進(jìn)樣，根據(jù)色譜圖中組分的峰面積(或峰高)對組分含量作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。在相同操作條件下,，依據(jù)樣品的峰面積(或峰高)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其相應(yīng)含量,。利用氣相色譜可分離,、檢測白酒中的甲醇含量，在相同的操作條件下,，分別將等量的試樣和含甲醇的標(biāo)準(zhǔn)樣進(jìn)行色譜分析,，由保留時(shí)間可確定試樣中是否含有甲醇，比較試樣和標(biāo)準(zhǔn)樣中甲醇峰的峰面積,，可確定試樣中甲醇的含量,。　　三,、儀器與試劑　　1. 儀器：GC-9860II氣相色譜儀,，氫火焰檢測器(FID)，色譜工作站,，毛細(xì)管柱,，10μL微量注射器1支，100mL容量瓶1只,，25mL容量瓶5只,，5mL吸量管1只?！　?. 試劑　　甲醇(色譜醇),，60%乙醇水溶液(不含甲醇)。取1μL進(jìn)樣無甲醇峰即可,?！　∷摹?shí)驗(yàn)步驟　　1. 色譜柱的準(zhǔn)備　　將內(nèi)徑為0.32mm,、長為30m,，液膜厚0.5μm的石英毛細(xì)管柱安裝調(diào)試正常?！　?. 色譜操作條件：檢測器FID;進(jìn)樣口溫度180℃;檢測器溫度200℃;柱溫50℃,。　　3. 甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制　　100mL 容量瓶中裝有少量 60%的乙醇溶液, 然后電子天平上準(zhǔn)確稱量 0.5000g 的色譜甲醇于此容量瓶中, zui后用60%的乙醇溶液定容, 此溶液為 5g/L 的甲醇儲(chǔ)備液,?！　?zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)甲醇儲(chǔ)備液 1.0，2.0,，3.0,，4.0,，5.0mL, 分別置于 5個(gè) 25mL 容量瓶中, 用 60%乙醇稀釋到刻度, 混勻，分別得到0.2,，0.4,，0.6，0.8,，1.0 mg/mL的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液系列,,。　　4. GC-9860II氣相色譜使用方法　　(1)打開氣體發(fā)生器,，確認(rèn)凈化器上各開關(guān)閥處于全開的位置(ON),，等到氮?dú)猓瑲錃?，空氣的壓力達(dá)到相應(yīng)的值后(約30-40min),，打開儀器電源開關(guān)，進(jìn)入D-7900工作站,，設(shè)定進(jìn)樣口溫度180℃,，檢測器溫度200℃，柱溫50℃,。點(diǎn)開對應(yīng)的檢測器信號(hào)通道(FID：1通道),，等儀器升溫穩(wěn)定,?！　?2)點(diǎn)火：查看檢測器溫度，等檢測器溫度達(dá)到設(shè)定值后,，確認(rèn)儀器右側(cè)下面氣路面板上對應(yīng)檢測器的空氣和氫氣閥處于全開的位置,。按點(diǎn)火鍵，確認(rèn)所使用的檢測器火已點(diǎn)著(看是否有水蒸氣產(chǎn)生和基線是否有變化),。等基線水平后,，依次進(jìn)樣分析?！　?3)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,，應(yīng)當(dāng)先將氫氣發(fā)生器關(guān)閉，然后把柱箱溫度設(shè)為30度,，把進(jìn)樣器和檢測器關(guān)閉,，降溫，等柱箱溫度低于50℃以下才能退出軟件,，關(guān)閉儀器電源開關(guān),，關(guān)閉氣體發(fā)生器?！　?. 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的制作　　用微量注射器吸取1μL各色譜級(jí)甲醇注入色譜儀,，獲得色譜圖,，以保留時(shí)間作為對照定性，確定甲醇色譜峰,?！　≡谏V工作站建立新方法(面積外標(biāo)法)，在確定的色譜條件下, 依次由低到高分別用注射器準(zhǔn)確取 1μL 標(biāo)準(zhǔn)使用液進(jìn)行分析, 每個(gè)濃度點(diǎn)用色譜儀分析3次,，測得它們的峰面積, 結(jié)果以甲醇平均峰面積為縱坐標(biāo)Y,，甲醇濃度為橫坐標(biāo)x，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,，得到線性方程和相關(guān)系數(shù),。　　5. 白酒樣品中甲醇含量的測定　　在相同色譜條件下, 吸取1μL白酒樣品進(jìn)行分析,，分析結(jié)果由色譜工作站直接計(jì)算得出,。樣品重復(fù)測定3 次, 取平均值, 便可得到白酒樣品中甲醇的含量?！　∷伎碱}：　　1. 為什么甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液要以60%乙醇水溶液為溶劑配制?配制甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液還需要注意些什么?　　答：因?yàn)榇郎y的為白酒,，白酒里面含有乙醇，所以為了排除其他因素,，保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性需要控制變量,，則需要標(biāo)準(zhǔn)溶液中也含有等量的乙醇?！　∨渲萍状既芤盒枰獫櫹匆埔汗?，讀刻度時(shí)視線要與凹液面在一個(gè)水平面上面，向容量瓶中加入60%乙醇水溶液時(shí)到zui后1-2毫米時(shí)要用膠頭滴管逐滴加入,?！　?. 外標(biāo)法定量的特點(diǎn)是什么?外標(biāo)法定量的主要誤差來源有哪些?　　答：(1)將未知樣品中某一物質(zhì)的峰面積與該物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積直接比較進(jìn)行定量?！　?2)待測樣品中所含的測定物質(zhì)含量過少,，儀器無法分析得到結(jié)果;在加入物質(zhì)到色譜儀中時(shí)，加入的體積沒有掌握好,，加入的體積有誤差,。