(一)聚丙烯酰胺凝膠
聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成凝膠,,是以丙烯酰胺為單位, 由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的,,經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀,控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號(hào)的凝膠,。交聯(lián)劑越多,,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠-P (Bio-Gel P),,由日本tosoh的TSKGEL的pw系列,,適合蛋白和多糖的純化。即丙烯酰胺和少量交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺,,在催化劑過硫酸銨作用下聚合形成凝膠,。
聚丙烯酰胺(PAM,,polyacrylamide)
聚丙烯酰胺簡(jiǎn)稱PAM,分子量100~500萬,。聚丙烯酰胺主要有兩種商品形式,,一種是粉末狀的,另一種是膠體,,還有聚丙烯酰胺乳液 (上海合成樹脂研究所研制) 。易溶于冷水,,速度很慢,,高分子量的聚丙烯酰胺當(dāng)濃度超過10%以后.就會(huì)形成凝膠狀結(jié)構(gòu)。提高溫度可以稍微促進(jìn)溶解,,但溫度不得超過50℃,,以防發(fā)生分子降解。難溶于有機(jī)溶劑,。溫度超過120 ℃時(shí)分解,。中性,無毒,。用作增稠劑,、絮凝劑、減阻劑,,具有凝膠,、沉降、補(bǔ)強(qiáng)等作用,。貯存于陰涼,、通風(fēng)、干燥的庫房?jī)?nèi),,防潮,、避光、防熱,。存放時(shí)間不宜過長(zhǎng),。
(二)交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex)
?、?Sephadex G 交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephndex,,不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍,。例如,,G-25為每克凝膠膨脹時(shí)吸水2.5克,同樣G-200克每克千膠吸水20克,。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G-10,,G-15,,G-25,G-50,,G-75,,G-100,G-150,,和G-200,。因此,“G”反映凝膠的交聯(lián)程度,,膨脹程度及分部范圍,。
⑵ Sephadex LH-20,,是Sephadex G-25的羧丙基衍生物,,能溶于水及親脂溶劑,用于分離不溶于水的物質(zhì),。
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瓊脂糖 Agarose,縮寫為 AG,,是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份,,也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學(xué)結(jié)構(gòu)由β-D-吡喃半乳糖 (1-4) 連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構(gòu)成,。
把瓊脂糖,,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶于熱水,,冷卻制成的凝膠,。制成的小顆粒用于凝膠過濾。適于用sephadex不能分級(jí)分離的大分子的凝膠過濾,,若使用5%以下濃度的凝膠,,也能夠分級(jí)分離細(xì)胞顆粒、病毒等,。利用其吸附性小的特點(diǎn),,有時(shí)用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物,。
瓊脂糖凝膠商品名很多,,常見的有,Sepharose(瑞典,,pharmacia ),,Bio-Gel-A(美國(guó),Bio-Rad)等,。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),,網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度,。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,,可以在許多條件下使用
凝膠色譜法(如水,,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,,也不能高壓消毒,,可用化學(xué)滅菌活處理。
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商品為Styrogel,,具有大網(wǎng)孔結(jié)構(gòu),可用于分離分子量1600到40,,000,000的生物大分子,,適用于有機(jī)多聚物,,分子量測(cè)定和脂溶性天然物的分級(jí),凝膠機(jī)械強(qiáng)度好,,洗脫劑可用甲基亞砜,。
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