目的日常生活中,，大面積深度燒傷、糖尿病,、創(chuàng)傷等因素常造成正常皮膚結(jié)構(gòu)完整性及生理功能的破壞,。如何有效的修復創(chuàng)面,、重建皮膚正常組織結(jié)構(gòu)恢復皮膚正常生理功能,，成為目前實驗研究以及臨床治療的難點。皮膚損傷的修復是一個非常復雜的過程,，由多種生長因子及細胞因子介導,，其中角質(zhì)細胞生長因子(KGF)發(fā)揮了重要的作用。角質(zhì)細胞生長因子為成纖維細胞生長因子家族的一員,，它通過與受體(KGFR)結(jié)合發(fā)揮作用,，是一種促上皮細胞增殖的生長因子，與創(chuàng)面愈合息息相關(guān),，還與免疫重建,、器官發(fā)育、腫瘤發(fā)生等多方面關(guān)系密切,。該因子由間質(zhì)細胞分泌,，其表達受IL-1、血小板衍生生長因子BB,、轉(zhuǎn)化生長因子,、腫瘤壞死因子等細胞因子的正調(diào)控作用影響，通過間充質(zhì)一上皮相互作用方式,，對多種組織器官,，包括肺、皮膚,、呼吸道,、頭發(fā)毛囊、胃腸道,、膀膚等的上皮損傷的修復發(fā)揮重要作用,，但是KGF的生物學性質(zhì)尚未*了解。本實驗旨在研究成纖維細胞產(chǎn)生的角質(zhì)細胞生長因子(KGF)對表皮細胞增殖的影響,。方法取16-30歲患者手術(shù)切除的包皮修剪至全厚皮片，外分離培養(yǎng)成纖維細胞和表皮細胞,，取第二代的成纖維細胞提取總RNA采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應法(RT-PCR)檢測人皮膚成纖維細胞中KGF基因的轉(zhuǎn)錄水平,，對第2代的成纖維細胞培養(yǎng)48 h后，收集細胞培養(yǎng)液用酶聯(lián)免疫吸附法((ELISA)檢測培養(yǎng)液中KGF的濃度,，之后對第2代表皮細胞進行傳代,，分別用K-SFM(不含KGF) }  K-SFM(含1 ng/mL的KGF) } DMEM(含10%的FBS)和成纖維細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)24h, 36h, 48h, 60h, 72h}用細胞計數(shù)法、MTT法和免疫熒光的方法檢測各實驗組培養(yǎng)液對表皮細胞增殖的促進作用,。zui后對所得數(shù)據(jù)經(jīng)行統(tǒng)計學處理,。

結(jié)果RT-PCR結(jié)果顯示，可擴增獲得KGF,，說明人皮膚成纖維細胞中KGF轉(zhuǎn)錄水平顯著,，酶聯(lián)免疫吸附法((ELISA)可檢測到人皮膚成纖維細胞培養(yǎng)液中存在較高水平的KGF,，細胞計數(shù)結(jié)果和MTT結(jié)果表明，添加KGF的K-SFM和成纖維細胞培養(yǎng)液均能夠促進表皮細胞增殖,，亦可保持表皮細胞的活性,，并用免疫熒光檢測方法得出，人皮膚成纖維細胞培養(yǎng)液中的KGF能夠與表皮細胞表面的KGF特異性受體相結(jié)合,。結(jié)論本實驗得出體外分離培養(yǎng)的人皮膚成纖維細胞中KGF轉(zhuǎn)錄水平顯著,，成纖維細胞培養(yǎng)液中較其他對照組能夠檢測到高濃度的KGF，且各組差異具有統(tǒng)計學意義(P <0.01)}說明成纖維細胞能夠合成和釋放KGF,，且可與表皮細胞表面的KGF特異性受體相結(jié)合而發(fā)揮其特異性作用,，成為其促進表皮細胞增殖的重要因素，從而促進創(chuàng)面修復的進程,。