定氮儀是利用凱氏定氮法對物質中蛋白質含量進行測定的儀器。定氮儀按其配置分,,可以分為全自動凱氏定氮儀和半自動定氮儀。其中全自動凱氏定氮儀包括消化爐和凱氏蒸餾裝置,。定氮儀操作時可以分為人工模式和自動模式,,不同的實驗者,可以根據(jù)對實驗操作的熟練程度,,自由選擇哪種方式,。目前,定氮儀已經廣泛使用于測定乳核乳制品中蛋白質的測定,。
下面我們主要介紹下,,我們在使用定氮儀測定蛋白質含量時,如何清洗定氮儀,。
儀器安裝前,,定氮儀各部件需經一般方法洗滌干凈,所用橡皮管,、塞須浸在10%NaOH溶液中,,煮約10min,水洗,、水煮10min,,再水洗數(shù)次,然后安裝并固定在一只鐵架臺上,。
儀器使用前,,微量全部管道都須經水蒸氣洗滌,以除去管道內可能殘留的氨,,正在使用的定氮儀,,每次測樣前,蒸氣洗滌5min即可,。較長時間未使用的儀器,,重復蒸氣洗滌,,不得少于三次,并檢查儀器是否正常,。仔細檢查各個連接處,,保證不漏氣。這樣,,一方面保證了儀器的清潔,,另一方面,也同時對儀器進行了檢查,,一些壞的零部件,,可以及時被查出并替換。
定氮儀安裝完后,,我們需具體對儀器的內部進行清潔,。首先在定氮儀蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水,加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,,以避免水中的氨被蒸出而影響結果,,并放入少許沸石(或毛細管等),以防爆沸,。這個步驟有點類似于凱氏定氮法的消化前步驟,,用相應的試劑對其進行清洗。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經插管流入反應室,,但玻杯內的水不要放光,,塞上棒狀玻塞,保持水封,,防止漏氣,。這一步可直接驗證插管是否可以使用。蒸氣發(fā)生后,,立即關閉廢液排放管上的開關,,使蒸氣只能進入反應室,導致反應室內的水迅速沸騰,,蒸出蒸氣由反應室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻,,在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水。從定氮球發(fā)燙開始計時,,連續(xù)蒸煮5min,,然后移開煤氣燈。沖洗完畢,,夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管,,由于氣體冷卻壓力降低,反應室內廢液自動抽到反應室外殼中,打開廢液排出口夾子放出廢液,。整個清洗過程,,到這里就結束了,經過清洗這個過程,,定氮儀內部環(huán)境已經符合我們測定蛋白質含量的需求,,另外,定氮儀的各部件也得到了檢驗,,可以及時更換漏氣或者其他壞了的部分。根據(jù)以上步驟重復清洗2~3次,,再在冷凝管下?lián)Q放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中,,蒸餾1~2min,觀察錐形瓶內的溶液是否變色,。如不變色,,表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去錐形瓶,,再蒸餾1~2min,,用蒸餾水沖洗冷凝器下口,關閉煤氣燈,,定氮儀即可供測樣品使用,。
這樣,凱氏定氮儀整個清洗過程就結束了,。凱氏定氮儀在測定蛋白質含量前,,一般都需要經過清洗,這樣對于測定結果,,會更加,。另外,也可以保證實驗室人員的安全,,因為在清洗過程中,,對儀器進行了檢查,排除了因為儀器的故障而造成了危險
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