ELISA試劑盒操作中的實驗禁忌
酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)因其操作簡單,靈敏度高,,特異性好,,經濟安全等特點而在臨床上廣泛應用,但是由于其操作步驟復雜,,一般包括試劑準備,,樣本收集,加樣,,溫育,,洗滌,顯色,,比色,,結果判定等,其中任何一項操作不當都會對檢測結果產生很大影響,。因此,,必須加強ELISA檢測的全面質量控制,保證其結果的準確可靠,。Elisa實驗結果的影響因素包括檢測樣品因素,、操作因素等,。在實驗操作的過程中有一些技術要點,在這里,,上海恒遠生物公司為大家分享操作Elisa試劑盒的實驗禁忌(供參考):
ELISA試劑盒操作
1,、加樣后及時放人孵箱,標本較多時,,要分批操作,。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,,難以清洗*。
2,、作時必須戴手套,,穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,。
3,、剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄,。
4,、同批號試劑組分不得混用。
5,、洗滌時各孔均需加滿液體,,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6,、每次實驗留一孔作為空白調零孔,,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4,。測量時先用此孔調OD值至零,。
7、要確保微量加樣器的準確性,,可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由于蒸餾水不含雜質,,溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水可以看作是lg,、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該將其zui高量程和zui低量程進行確定,。
8、在使用微量加樣器時,,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,,即使吸取標準品溶液。
9,、吸取液體時速度不易太快,,以免產生氣泡,吸取的量不夠準確,。
10,、手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干,。
11,、底物為TMB,避免與皮膚相接觸,。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,,應盡量避免接觸皮膚。
ELISA檢測操作步驟復雜,,可能會影響測定結果的因素較多,,分布在測定操作的各個步驟中,因此必須加強各環(huán)節(jié)的質量控制,,才能得到準確可靠的檢測結果,。上海恒遠生物供應高品質ELISA試劑盒,提供免費代檢測服務及ELISA全程技術指導服務,。
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