ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)加樣要求

ELISA試劑盒具有靈敏,、特異、簡(jiǎn)單,、快速,、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,，因此在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,。

    在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本,，加酶結(jié)合物，加底物,。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部,，并注意不可濺出,，不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,，按規(guī)定的量加入板孔中,。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,，以免發(fā)生交叉污染,，也可用一次性的定量塑料管加樣,。

   有此測(cè)定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀釋的血清,，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣,。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本,，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,，在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后,。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,，這一保溫過(guò)程稱為溫育(incubation),，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng),。

   按ELISA試劑盒說(shuō)明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑,。ELISA試劑盒中用的蒸餾水或去離子水,，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正,。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用,。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存,。