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液相色譜柱的使用方法

來源:北京富瑞恒創(chuàng)科技有限公司   2016年02月19日 14:39  

色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考,。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相,、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,,在做柱性能測試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測試所使用的條件是條件),只有這樣,,測得的結(jié)果才有可比性,。

  1、樣品的前處理:

  a,、使用流動(dòng)相溶解樣品,。

  b,、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì),。

  c、使用0.45µm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì),。

  2,、流動(dòng)相的配制:

  液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):

  a,、流動(dòng)相對樣品具有一定的溶解能力,,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中)。

  b,、流動(dòng)相具有一定惰性,,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。

  c,、流動(dòng)相的黏度要盡量小,,以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度),。

  d,、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器,,使用對紫外吸收較低的溶劑配制,。

  e,、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行,。

  f、在流動(dòng)相配制好后,,一定要進(jìn)行脫氣,。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用,。

  3,、流動(dòng)相流速的選擇:

  因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效,。對于一根特定的色譜柱,,要追求柱效,使用流速,。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,,流速一般選擇1ml/min,對于內(nèi)徑為4.0mm柱,,流速0.8ml/min為佳,。

  當(dāng)選用流速時(shí),分析時(shí)間可能延長,??刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量),。  北京富瑞恒創(chuàng)科技有限公司,。

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