細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作基本技術(shù)：

1. 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌,，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面,，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘后,，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺,，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10 分鐘以上后,，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株之操作,。

2.工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,，并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少Class II)。操作過程中,，應(yīng)避免引起aerosol 之產(chǎn)生,，小心藥品，例如DMSO 及TPA 等,，并避免尖銳針頭之傷害等,。

3. 無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品,，例如試管架,、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,，以利于氣流之流通,。實(shí)驗(yàn)用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域,，勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作,。
4. 小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染,。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,，以手夾住瓶蓋并握住瓶身,，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面,。
5.定期檢測下列項(xiàng)目：5.1CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度,、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水,，每周更換),。5.3.無菌操作臺內(nèi)之airflow壓力,，定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)(300小時/預(yù)濾網(wǎng),，3000小時/HEPA),。6.水槽可添加消毒劑(Zephrin1:750)，定期更換水槽的水