ELISA實(shí)驗(yàn)的操作步驟
elisa實(shí)驗(yàn)的成功操作步驟的正確起著至關(guān)重要的作用,,一些老師剛接觸elisas方法可能對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作步驟不是很了解,現(xiàn)為您解說(shuō)elisa實(shí)驗(yàn)詳細(xì)的操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
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