應(yīng)如何正確使用熒光分光光度計來進(jìn)行測試呢,？以下將由上海旦鼎技術(shù)人員為您詳述：

熒光分光光度計詳細(xì)測試步驟

(一)樣品準(zhǔn)備

1.液體樣品根據(jù)用戶提供的技術(shù)指標(biāo),，檢查濃度范圍是否合適,，如果需要稀釋,，則要考慮所需溶劑類型和稀釋倍數(shù)。

2.固體樣品均勻粉末,、片狀或具有光滑平面的塊狀樣品,，均可直接測定。

(二)操作步驟

1.開機(jī)：接通電源,，打開主機(jī)開關(guān),，點(diǎn)燃(打開)光源后，根據(jù)說明書要求啟動計算機(jī),。

2.檢測前準(zhǔn)備：參照儀器說明書,，在20天內(nèi)至少進(jìn)行一次激發(fā)校準(zhǔn)和發(fā)射校準(zhǔn)，檢測前儀器應(yīng)預(yù)熱,。

3.工作條件的選擇：環(huán)境溫度應(yīng)在20℃±5℃;相對濕度不大于70%;電源穩(wěn)定,，無磁場、電場干擾,。根據(jù)樣品的特性及熒光強(qiáng)度,，選擇合適的儀器工作條件(如狹縫、PM增益,、響應(yīng)時間等),。

4.基本測定

(1)熒光激發(fā)光譜測定

設(shè)置儀器參數(shù)，掃描發(fā)射波長,，找到maxλem,，以此為發(fā)射波長，記錄發(fā)射強(qiáng)度作為激發(fā)波長的函數(shù),，便得到激發(fā)光譜,。

(2)熒光發(fā)射光譜測定

設(shè)置儀器參數(shù)，掃描激發(fā)波長,，找到maxλex,，以此為激發(fā)波長，記錄發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系,，便得到熒光發(fā)射光譜,。

(3)差譜測定

設(shè)置儀器參數(shù)，選擇合適的工作方式,，測定背景溶液的發(fā)射光譜并儲存起來,，在一定的工作方式下，掃描樣品溶液的發(fā)射波長,，得到當(dāng)時的光度值和儲存的背景值之間的差示值,，即差譜。

(4)峰面積積分

選擇適當(dāng)?shù)墓ぷ鞣绞?，對樣品溶液進(jìn)行積分操作,，即得到峰面積積分,。

(5)熒光強(qiáng)度

選擇合適的測量參數(shù)，設(shè)置λex,、λem,，采用定點(diǎn)讀數(shù)或掃描方式，即可測得所選波長處的熒光強(qiáng)度,。

(6)定量測定

配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在一定的測定條件下,，設(shè)置λex,、λem，按照由稀至濃的次序,，測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度,，繪制熒光強(qiáng)度—濃度的工作曲線，不改變儀器參數(shù)測定未知溶液的熒光強(qiáng)度,，由工作曲線即可求出未知溶液的濃度,。

(三)分析結(jié)果的表述

1.熒光激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及其他光譜由儀器控制電腦直接繪出,。

2.峰面積積分,、熒光強(qiáng)度由儀器控制電腦計算顯示。

3.定量測試：在相同的測定條件下,，測定一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度,，繪制出熒光強(qiáng)度-濃度的工作曲線。濃度未知的溶液的熒光強(qiáng)度測定后,，由工作曲線求出該溶液的濃度,。

熒光分光光度計使用注意事項

1.在實驗開始前，應(yīng)提前打開儀器預(yù)熱,，并配制好所需的溶液,，對于已經(jīng)配制好的溶液，在不用時放在4℃冰箱中保存,，放置時間*過一星期的溶液要重新配制,。

2.實驗所用的樣品池是四面透光的石英池，拿取的時候用手指掐住池體的上角部,，不能接觸到四個面,，清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對其四個面進(jìn)行輕輕擦拭。

3.在測試樣品時,，注意熒光強(qiáng)度范圍的設(shè)定不要太高,，以免測得的熒光強(qiáng)度*過儀器的測定上限。

4.實驗結(jié)束后,，要及時的清理臺面,，處理廢液,，清洗和放置好樣品池，將下次要用的溶液放回冰箱,，并且按規(guī)定登記實驗記錄,，養(yǎng)成良好的實驗習(xí)慣。

通過以上介紹對于熒光分光光度計的測試步驟及使用注意事項,，您是否了解了呢,？如有不明之處，歡迎隨時與我們,！

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