上海恒遠(yuǎn)詳細(xì)解說(shuō)捕獲包被法測(cè)抗體
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體,。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,,稱為"結(jié)合物"(conjugate),;(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法,。下面我們?cè)敿?xì)解說(shuō)下捕獲包被法測(cè)抗體:
IgM抗體的檢測(cè)用于傳染病的早期診斷中。間接法ELISA一般僅適用于檢測(cè)總抗體或IgG抗體,。如用抗原包被的間接法直接測(cè)定IgM抗體,,因標(biāo)本中一般同時(shí)存在較高濃度的IgG抗體,后者將競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗原而使一部份IgM抗體不能結(jié)合到固相上,。因此如用抗人IgM作為二抗,,間接測(cè)定IgM抗體,必須先將標(biāo)本用A蛋白或抗IgG抗體處理,,以除去IgG的干擾,。在臨床檢驗(yàn)中測(cè)定抗體IgM時(shí)多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相,,以捕獲血清標(biāo)本中的IgM(其中包括針對(duì)抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM),。然后加入抗原,此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合,。繼而加酶標(biāo)記針對(duì)抗原的特異性抗體,。再與底物作用,呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān),。此法常用于病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒(HAV)抗體的檢測(cè)模式見(jiàn)圖,。
類風(fēng)濕因子(RF)同樣能干擾捕獲包被法測(cè)定IgM抗體,,導(dǎo)致假陽(yáng)性反應(yīng)。因此中和IgG的間接法近來(lái)頗受青睞,,用這類試劑檢測(cè)抗CMV IgGM和抗弓形蟲(chóng)IgM抗體已獲成功,。
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