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細(xì)胞培養(yǎng)箱所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的種類

來源:上海島韓實(shí)業(yè)有限公司   2015年11月23日 11:48  

   對細(xì)胞培養(yǎng)箱所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的種類和使用建議,也有一定的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范:細(xì)胞培養(yǎng)主要重點(diǎn)在于保持無菌操作,,避免微生物及其他有害因素的影響,。
  1.顯微鏡:倒置式顯微鏡是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室日常工作常規(guī)*設(shè)備,,主要用于日常了解細(xì)胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生,。如資金允許,,建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡,、解剖顯微鏡,、熒光顯微鏡,、錄像系統(tǒng)或縮時(shí)電影拍攝裝置等,可隨時(shí)拍攝并記錄細(xì)胞生長情況,。
  超凈工作臺:目前絕大部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺實(shí)現(xiàn)無菌操作,,具有操作簡單,、安裝方便、占用空間小且凈化效果很好,。超凈工作臺主要有兩種——側(cè)流式(垂直式)和外流式(水平層流式),。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由離心風(fēng)機(jī)壓入靜壓箱,,再經(jīng)空氣過濾器精濾,,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風(fēng)速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境,?!?/span>
  2.(1)側(cè)流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),,形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌,,工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式;
 ?。?)外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動,,因而外方氣流不致混入操作,工作臺結(jié)構(gòu)為開放式,,但進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)操作對操作者不利,。超凈工作臺應(yīng)需要定期請有關(guān)部門檢查潔凈度,符合要求的超凈工作臺其潔凈度應(yīng)達(dá)到100級,,用塵埃粒子計(jì)數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應(yīng)超過3.5個(gè)/L,;空氣流量應(yīng)控制在0.75-1.0m3/s;細(xì)菌菌落數(shù)平均<1個(gè),,根據(jù)無菌狀況必要時(shí)需要置換過濾器,。
  3.培養(yǎng)箱:體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,,一般zui適生長溫度為37℃,溫差變化不應(yīng)超過±0.5℃,。溫度升高2℃時(shí),,變不利于細(xì)胞生存,溫度達(dá)到40℃以上細(xì)胞將很快死亡,。因此,,可控溫的恒溫培養(yǎng)箱、CO2培養(yǎng)箱是選擇,。
 ?。?)恒溫培養(yǎng)箱:應(yīng)選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱,此類培養(yǎng)箱靈敏度高,,溫度控制較穩(wěn)定,。一般的恒溫培養(yǎng)箱價(jià)格較便宜,,其缺點(diǎn)是只宜于作密閉式培養(yǎng)。
 ?。?)CO2培養(yǎng)箱:目前多數(shù)的細(xì)胞培養(yǎng)室已廣泛使用,。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)是能夠提供進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH,,適用于開放或半開放培養(yǎng),。使用培養(yǎng)瓶時(shí),為使培養(yǎng)瓶內(nèi)與外界保持通氣狀態(tài),,可將瓶蓋略微旋松,,為避免細(xì)胞被污染,使用這種培養(yǎng)方式時(shí),,培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔,,需定期用紫外線照射或酒精消毒,同時(shí)培養(yǎng)箱內(nèi)應(yīng)放置盛有無菌蒸餾水的水槽,,防止培養(yǎng)液蒸發(fā),,保持箱內(nèi)相對濕度在100%。
 ?。?)細(xì)胞培養(yǎng)耗材:培養(yǎng)細(xì)胞的器皿可用培養(yǎng)皿,、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶,萊貝在本篇不做詳細(xì)介紹,,這部分知識會在實(shí)驗(yàn)室耗材知識部分作重點(diǎn)介紹,。
  4.烘箱(干燥箱):用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,,玻璃器皿等須干熱消毒,。干熱消毒時(shí),烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到160℃以上,,通常使用鼓風(fēng)式烘箱,。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好,,缺點(diǎn)是升溫過程較慢,。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開始,至100℃時(shí),,停止鼓風(fēng),。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長,。消毒后不能立即打開箱門,,以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂,應(yīng)等溫度自然下降至100℃以下后可開門。
  5.水純化裝置:細(xì)胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,,細(xì)胞培養(yǎng),、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)液體的配制用水以及清洗細(xì)胞培養(yǎng)器皿用水都必須事先經(jīng)過嚴(yán)格的純化處理。目前有多種純化方法相結(jié)合,,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,,可掛壁式、臺式,、可配儲水箱,、也可直接用分液槍、還可根據(jù)各類實(shí)驗(yàn)用水要求選擇配置殺菌功能,,有效去除DNA酶,、RNA酶、蛋白酶等,,更有可有效去除掉熱源,、內(nèi)毒素的超濾型純水裝置。
  6.冰箱:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室*設(shè)備,,應(yīng),,不得存放易揮發(fā)、易燃燒等對細(xì)胞有害的物質(zhì),,且應(yīng)保持清潔,。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱,。(1)普通冰箱:儲存培養(yǎng)液,、生理鹽水、Hanks液試劑等培養(yǎng)用的物品,,可短期保存組織樣本,。(2)-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱:用于儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時(shí)期存放的制劑,,如酶,、血清等。
  7.細(xì)胞冷凍儲存器:儲存器常用的液氮容器,,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格,。選擇液氮容器時(shí)需要考慮三個(gè)因素:容積大小、取放使用方便,、液氮揮發(fā)量。液氮容器的大小一般在25-500L,,可以儲存1ml的安瓿250-15000個(gè)左右,。液氮溫度zui低文帝可達(dá)-196℃,使用時(shí)應(yīng)注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),,需注意觀察剩余液氮量,,及時(shí)補(bǔ)充,避免液氮不足使細(xì)胞受損或死亡,。目前有許多智能型細(xì)胞冷凍儲存器可供選擇,,可配置有電子控制器的液氮儲存器,實(shí)現(xiàn)凍存自動化,;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點(diǎn);可配置報(bào)警系統(tǒng),,設(shè)置液氮液面,、溫度、電池,、電壓,、電源等失常情況下報(bào)警;同時(shí)具備熱氣體旁路系統(tǒng),,防止高于-130℃的暖空氣進(jìn)入液氮罐,,從而更有效地保護(hù)樣品,防止容器內(nèi)升溫,。另外,,可選擇液氮供應(yīng)罐通過連接管給儲存罐補(bǔ)充液氮,保證樣品安全,。
   上海島韓實(shí)業(yè)有限公司專業(yè)從事科學(xué)儀器,環(huán)境設(shè)備的研究與開發(fā).經(jīng)營各類干燥箱,,培養(yǎng)箱,試驗(yàn)箱,,振蕩器,、代理進(jìn)口實(shí)驗(yàn)天平等。

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