TNF試劑盒的檢測原理及使用注意

　　檢測原理: TNF試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中TNF-α的濃度。TNF-α捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上,，當加入標本或參考品時,，其中的TNF-α會與捕獲抗體結(jié)合，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去,。當加入生物素化的抗人TNF-α抗體后,，抗人TNF-α抗體與TNF-α接合，形成夾心的免疫復(fù)合物,，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去,。隨后加入辣根過氧化物酶標記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合,，親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來,；其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。zui后加入顯色劑,，若樣本中存在TNF-α將會形成免疫復(fù)合物,，辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì),，在加入終止液后呈黃色,。通過酶標儀檢測，讀其450nm處的OD值,，TNF-α濃度與OD450值之間呈正比,，通過參考品繪制標準曲線,，對照未知樣本中OD值，即可算出標本中TNF-α濃度,。

　　注意事項:

　　1.TNF試劑盒請保存在2～8℃,。

　　2.濃縮洗滌液因在低溫下可能有結(jié)晶，請水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再配制工作液,。

　　3.若標準品復(fù)溶后,，請在三天內(nèi)用完。

　　4.底物請勿接觸氧化劑和金屬,。

　　5.加樣時,，請及時更換槍頭，避免交叉污染,。

　　6.嚴禁混用不同批號的試劑盒組份,。

　　7.充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的準性很重要，在加液后請輕輕叩擊邊緣以保證混勻,。

　　8.室溫反應(yīng),，請嚴格控制在25～28℃。

　　9.洗滌過程是至關(guān)重要的,，洗滌不充分會使度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大,。

　　10.試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔。

　　11.加樣過程中避免氣泡的產(chǎn)生,。

　　12.血清和血漿標本的檢測時,，檢測抗體的孵育時間應(yīng)適當延長。TNF試劑盒的檢測原理及使用注意

　　檢測原理: TNF試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣本中TNF-α的濃度,。TNF-α捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上,，當加入標本或參考品時，其中的TNF-α會與捕獲抗體結(jié)合,，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去,。當加入生物素化的抗人TNF-α抗體后，抗人TNF-α抗體與TNF-α接合,，形成夾心的免疫復(fù)合物,，其它游離的成分通過洗滌的過程被除去。隨后加入辣根過氧化物酶標記的親合素,。生物素與親合素特異性結(jié)合,，親合素連接的酶就會與夾心的免疫復(fù)合物連接起來；其它游離的成分通過洗滌的過程被除去,。zui后加入顯色劑,，若樣本中存在TNF-α將會形成免疫復(fù)合物，辣根過氧化物酶會催化無色的顯色劑氧化成藍色物質(zhì)，在加入終止液后呈黃色,。通過酶標儀檢測,，讀其450nm處的OD值，TNF-α濃度與OD450值之間呈正比,，通過參考品繪制標準曲線,，對照未知樣本中OD值，即可算出標本中TNF-α濃度,。

　　注意事項:

　　1.TNF試劑盒請保存在2～8℃,。

　　2.濃縮洗滌液因在低溫下可能有結(jié)晶，請水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再配制工作液,。

　　3.若標準品復(fù)溶后,，請在三天內(nèi)用完。

　　4.底物請勿接觸氧化劑和金屬,。

　　5.加樣時,，請及時更換槍頭，避免交叉污染,。

　　6.嚴禁混用不同批號的試劑盒組份,。

　　7.充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果的準性很重要，在加液后請輕輕叩擊邊緣以保證混勻,。

　　8.室溫反應(yīng),，請嚴格控制在25～28℃。

　　9.洗滌過程是至關(guān)重要的,，洗滌不充分會使度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大,。

　　10.試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔。

　　11.加樣過程中避免氣泡的產(chǎn)生,。

　　12.血清和血漿標本的檢測時,，檢測抗體的孵育時間應(yīng)適當延長。