牛β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒　　

尊敬的客戶,，感謝你選用本公司的產(chǎn)品,。本產(chǎn)品適用于體外定量檢測牛血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液,、組織等中天然和重組的β-Lg濃度,。檢測其他特殊樣本請咨詢本公司。試劑盒僅供科研使用,。 使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑盒組分,。 如有疑問,，請武漢新啟迪生物科技有限公司。 您將得到我們的服務,。

本試劑盒采用雙抗體夾心法,，雙抗體夾心原理，是基于要測試的抗原具有二價以上的特性,，能識別包被抗體,，同時能識別檢測抗體，具體過程如下：

1. 將特異性抗體與固相載體連接,，形成固相抗體,，洗滌除去未結合的抗體及雜質(zhì)，并用無關蛋白封閉空余結合位點,。
2. 加受檢標本使之與固相抗體接觸反應一段時間,，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物,。洗滌除去其他未結合的物質(zhì),。
3. 加生物素標記抗體，使固相免疫復合物上的抗原與生物素標記抗體結合,。*洗滌未結合的生物素標記抗體,。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量正相關。
4. 加辣根過氧化物酶標記親和素,，使生物素標記抗體與辣根過氧化物酶標記的親和素結合,。*洗滌未結合的酶標記物。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量正相關,。
5. 加入底物顯色,，即可計算標本濃度。
6. 注：一個抗體分子上可以標記上若干個生物素分子,，一個生物素分子可以結合一個辣根過氧化物酶標記的親和素,，從而帶來了大量的辣根過氧化物酶結合到抗體上，比傳統(tǒng)的直接辣根過氧化物酶標記抗體具有更高的敏感性和放大效應,。

【牛β-Lg酶聯(lián)免疫試劑盒檢測原理】

本實驗采用雙抗體夾心ELISA法,。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為抗牛β-Lg單克隆抗體,。檢測相抗體為多克隆抗體,，經(jīng)生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,，PBS或TBS洗滌,。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

【牛β-Lg酶聯(lián)免疫試劑盒檢測原理示意圖】

 *步            第二部

第三步            第四步

【試劑盒組成】

名稱                             96 Tests            48 Tests                     保存條件

1．牛β-Lg抗體包被板條                  8×12                  8×6                            4/-20℃

2．牛β-Lg標準品                             2 支（凍干）     1 支（凍干）            4/-20℃

3．濃縮生物素化牛β-Lg抗體           1支                     1 支                          4/-20℃

4．濃縮酶結合物(ABC)                     1支                     1 支                        4/-20℃

5. 酶結合物(ABC)稀釋液           1瓶             1瓶               4/-20℃

6．抗體稀釋液                    1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

7．標準品稀釋液                  1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

8．樣品稀釋液　                  1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

9．濃縮洗滌液                                  1 瓶（25×）       1 瓶（25×）              4/-20℃

10．顯色劑A                                   1 瓶                   1 瓶 (避光)               4/-20℃

11．顯色劑B                                   1 瓶            1 瓶                    4/-20℃

12．終止液                                      1 瓶            1 瓶                          4/-20℃

13．說明書                                     1 份            1 份                          室溫

【試驗所需自備試驗設備和器材】

1. 酶標儀(450nm檢測波長濾光片,，570nm或630nm校正波長濾光片) ,。
2. 洗板機（可調(diào)注液量，保證每孔350μl洗液而不溢出）,。
3. 超凈工作臺,，生物安全柜，通風柜,。
4. 高精度單道加液器（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5. 高精度多道加液器（8道或12道,，量程為50-300μl).
6. 37℃恒溫箱。
7. 低溫離心機,。
8. 電冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.
9. 分析天平,。
10. 剪刀，鑷子,，鉗子等,。
11. 漩渦混合儀，低頻振蕩器等,。

【試驗所需自備試驗耗材及試劑】

1. 離心管（容量為1.5ml，5ml等）,。
2. 一次性吸頭（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl）.
3. 純凈水或蒸餾水,。
4. 坐標紙。
5. 吸水紙,。
6. EDTA,，枸櫞酸鈉，肝素

【標本收集注意事項】

1. 收集血液的試管應為一次性的無熱原,，無內(nèi)毒素試管,。
2. 血清和血漿避免使用溶血，高血脂標本,。
3. 標本應清澈透明,，懸浮物應離心去除。
4. 標本收集后若不及時檢測,，需按一次使用量分裝,，凍存于-20℃，-80℃電冰箱內(nèi),，避免反復凍融,。 
5. 可根據(jù)標本的實際情況，做適當倍數(shù)稀釋(建議做預實驗,，以確定稀釋倍數(shù)) ,。
6. 收集標本,，盡量做到雙份的用量，避免一次實驗失敗,，重復實驗時標本缺失,，從而耽誤實驗進程。
7. 收集標本時,，應該做好防護措施（比如戴手套,，口罩，護目鏡等）,，認為所有標本都具有一定的潛在危險性,。
8. 樣本處理應該在生物安全柜里面，并且正確使用生物安全柜,。