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關(guān)于血清的一些問題

來源:上海嶸崴達實業(yè)有限公司   2015年08月14日 16:57  

關(guān)于血清的一些問題

血清是細(xì)胞培養(yǎng)中zui重要的元素之一。因此,,我們特別整理了一些實驗室里常會遇到的問題,,供大家參考:
   1 存放血清的方法?
   我們建議血清應(yīng)保存在-20℃以下。然而,,若存放于4℃時,,請勿超過半個月。若您一次無法用完一瓶,,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。


   2 如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
   我們建議您將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。


   3 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理,?
   血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍地原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖素蛋白(形成凝血地蛋白之一)在血清解凍后,,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。
   若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。我們不建議你以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞您的過濾膜。


   4.為什么要熱滅活血清,?
   加熱可以滅活補體系統(tǒng),。激活的補體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,,細(xì)胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,,培養(yǎng)ES細(xì)胞,,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅活血清,。


   5.有必要做熱滅活嗎,?
   實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的 ,。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的活性,,而造成細(xì)胞生長速度的降低,。而經(jīng)過熱處理的 血清,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是微生物的分裂擴增,。
   因此我們建議您,,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步,。如此以來,,不但節(jié)省你寶貴的時間,更確保血清的質(zhì)量,。


   6.如何避免沉淀物的生產(chǎn),?
   我們建議您在使用血清的時候,注意下列的操作:
   ⑴.解凍血清時,,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
   ⑵.解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生
   ⑶.請勿將血清置于37℃太久,。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量,。
   ⑷.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無須做此步驟。
   ⑸.若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,、時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多

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