ELISA,、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項
ELISA取樣及運(yùn)輸注意事項
一,、血清提取方法:
1.全血促凝管取血,,輕輕顛倒兩三次,放置片刻讓全血凝固,,凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清,。
2.全血普通EP管取血,室溫放置2h左右,,讓其凝固,,凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。
特別注意:取血清避免震蕩,,以防止溶血,,溶血會對結(jié)果有影響。
二,、樣本取量及運(yùn)輸
每個指標(biāo)做單孔檢測,,一個樣本需取血清30ul,3個復(fù)孔需90 ul,,冰盒-20度中短時運(yùn)輸(小鼠建議采取摘眼球取血,,如果血樣有限在試驗方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合)。
三,、樣本編號
樣本標(biāo)號:
組別及樣本標(biāo)號,,要在管壁上標(biāo)注清晰,,特別注意6,,9的區(qū)分,可以使用英文標(biāo)注,。切記提供我司樣本清單,。
WB,、Q-PCR取樣及運(yùn)輸注意事項
一、細(xì)胞收集及保存
1,、貼壁細(xì)胞胰酶消化后900轉(zhuǎn)5min離心至管底(非貼壁細(xì)胞直接離心),,棄上清,將細(xì)胞凍存與-80度長期保存,,-20度,,暫時保存。若用于Q-PCR盡量使用滅菌無RNA酶離心管,,trizon或RNA樣本保存液中-80度長期保存,。
2、組織樣本取樣后立即-80或者液氮保存,。后續(xù)用于Q-PCR的取樣后立即存于液氮或者-80度環(huán)境中,,或者放于有trizon或RNA樣本保存液的滅菌無RNA酶離心管中-80度保存。
二,、樣本運(yùn)輸
短時2h左右冰袋或者液氮運(yùn)輸,,干冰(干冰可以維持-70度)密封郵寄運(yùn)輸。
三,、樣本編號
樣本標(biāo)號清晰,,切記提供我公司樣本清單。
病理實驗取樣及實驗注意事項
1,、動物組織提取后(玉米粒大小即可)迅速保存于4%多聚甲醛中固定,,管體標(biāo)號,組織塊盡量少帶血液,,或可以用多聚甲醛將樣本稍作清洗,,常溫保存,常溫運(yùn) 輸,。做電鏡的樣本由2.5%戊二醛固定于15ml離心管內(nèi),,樣本直徑小于2mm,常溫保存常溫運(yùn)輸,。提供我公司樣本清單,。
2、細(xì)胞樣本制作成爬片后PBS浸潤保存與細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi),,密封常溫運(yùn)輸,。做電鏡的細(xì)胞離心收集好后2.5%戊二醛固定,常溫運(yùn)輸,。
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